تلطيخ الكيمياء المناعية للكشف عن مستضدات فيروس داء
موسوعة JoVE للتجارب
علم المناعة
0 مشاهدة • 4:34 دقيقة • July 8th, 2025
ابدأ بشريحة تحمل قسم أنسجة دماغ الفأر المصاب بفيروس داء المثبت بالفورمالين والبارافين. يحتفظ القسم الثابت بالمستضدات الفيروسية عن طريق الربط المتقاطع للبروتين.
عالج الشريحة بمحلول زيلين لإزالة البارافين.
اغمر الشريحة في انخفاض تركيزات الإيثانول لترطيب الأنسجة ، مما يجعلها متوافقة مع المحاليل المائية.
إدخال مخزن مؤقت يحتوي على البروتياز لتعطيل الروابط المتقاطعة للبروتين ، وتحسين إمكانية الوصول إلى المستضد.
اغمر في بيروكسيد الهيدروجين لمنع البيروكسيديز الداخلي ، وتطبيق محلول مانع لمنع التفاعلات غير المحددة.
إدخال الأجسام المضادة الأولية الخاصة بمستضد داء ، وتشكيل مجمعات الأجسام المضادة للمستضد.
أضف الأجسام المضادة الثانوية البيوتينيل ، والتي ترتبط بالأجسام المضادة الأولية. احتضان مع إنزيمات بيروكسيداز المترافقة مع الستربتافيدين, التي تتفاعل مع البيوتين.
أدخل ركيزة بيروكسيداز ، تنتج راسب أرجواني أحمر.
قم بتلطيخ الأنسجة ببقعة نووية ، متبوعا بعامل زرقاء ، مما يؤدي إلى تلطيخ النوى باللون الأزرق.
تكشف صورة الكيمياء المناعية عن بقع حمراء أرجوانية في السيتوبلازم ، مما يؤكد وجود مستضدات داء في قسم الأنسجة.
باستخدام ميكروتوم ، اصنع قسما من البارافين بحجم 5 ميكرومتر. قم بتعويم القسم على حمام مائي عند 38 درجة مئوية ، واجمعه على شرائح زجاجية. قم بتسمية الشرائح بقلم مقاوم للكاشف. ضعي الشرائح في ص
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية