الكيمياء المناعية لدراسة العلاقة بين البلاعم والخلايا المناعية المتسللة

ابدأ بشريحة تحتوي على أقسام خزعة الشريان الصدغي المثبتة بالفورمالين ومنزوعة البارافينات والمعاد ترطيبها مع الخلايا المناعية المتسللة ، بما في ذلك الخلايا الليمفاوية والضامة.

تعبر البلاعم المنشطة عن مستقبلات حمض الفوليك بيتا أو FR-β — وهي علامة مرتبطة بالمرض ، تميز البلاعم عن الخلايا المناعية الأخرى.

انقل الشريحة إلى مخزن مؤقت مسخن مسبقا لاسترداد المستقبلات السطحية.

عالج القسم ببيروكسيد الهيدروجين ، مما يمنع نشاط البيروكسيديز داخل الخلايا.

أدخل مزيجا من الأجسام المضادة الأولية التي تستهدف CD3 و CD68 و FR-β ، والتي ترتبط بالخلايا المناعية التي تعبر عن هذه البروتينات.

أضف الأجسام المضادة الثانوية البيوتينيل ، والتفاعل مع الأجسام المضادة الأولية ، واغسلها.

تراكب مع الإنزيمات المترافقة بالستربتافيدين التي ترتبط بالبيوتين.

عالج بركيزة كروموجينيك تتفاعل مع الإنزيمات ، وتنتج رواسب بنية موضعية.

أدخل بقعة مضادة — الهيماتوكسيلين ، تلطيخ النوى باللون الأزرق.

تعرف مجهريا الخلايا الصغيرة المستديرة الملطخة باللون البني على أنها خلايا ليمفاوية تعبر عن CD3 وخلايا كبيرة غير منتظمة ملطخة باللون البني مثل البلاعم التي تعبر عن CD68 و FR-β.

حدد كمية البلاعم في القسم للعثور على نسبتها بين إجمالي الخلايا المناعية المتسللة.

لاسترجاع المستضد ، انقل الرف إلى وعاء زجاجي به 200 ميكرولتر من 95 درجة مئوية ، 10 م