موسوعة JoVE للتجارب
علم المناعة
0 مشاهدة • 4:34 دقيقة • July 8th, 2025
ابدأ بلوحة متعددة الآبار تحتوي على معلق أحادي الخلية للخلايا النخاعية لشبكية الفأر ، بما في ذلك الخلايا الدبقية الصغيرة والخلايا الوحيدة والعدلات.
الخلاياالدبقية الصغيرة - أو الخلايا المناعية البلعمة الشبكية ، تظهر مضان بسبب الجسيمات الحيوية ذات الأصل الفطري المليء بالفلوروفور ، والتي يتم حقنها مسبقا داخل الجسم الزجاجي.
أجهزة الطرد المركزي وإضافة الأجسام المضادة لمستقبلات FC ، مما يمنع مواقع التفاعل غير المحددة.
قدم مزيجا من الأجسام المضادة المسماة بالفلوروفور التي تستهدف بروتينات السطح CD11b و Ly6C و Ly6G ، وتتفاعل مع الخلايا النخاعية التي تعبر عنها.
إزالة الأجسام المضادة غير المرتبطة. يعالج بيوديد البروبيديوم ، الذي يتخلل الأغشية التالفة ، ويلطخ الخلايا الميتة حصريا.
في قياس التدفق الخلوي ، قم بإثارة يوديد البروبيديوم لاستبعاد الخلايا الميتة وتحديد الخلايا الحية غير الفلورية.
تضيء الخلايا بالليزر البنفسجي ؛ تدل الخلايا الحية المثارة على الخلايا النخاعية التي تعبر عن CD11b.
بعد ذلك ، أضيء بالليزر الأحمر ، مما يثير الفلوروفور الأحمر القريب داخل الخلايا الإيجابية CD11b ، مما يشير إلى الخلايا الوحيدة التي تعبر عن Ly6C والعدلات التي تعبر عن Ly6G.
إثارة الخلايا بالليزر الأزرق ؛ انبعاث التألق الأخضر من الخلايا الإيجابية CD11b المتبقية يؤكد امتصاص الخلايا الدبقية الصغيرة لجزيئات الفلورس
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية