مقايسة قياس التدفق الخلوي لتحديد المجموعات الفرعية للخلايا المناعية في خلايا الدم المحيطية أحادية النواة

خذ خلايا الدم المحيطية أحادية النواة أو PBMCs ، وهي مجموعة من الخلايا المختلطة بما في ذلك الخلايا الليمفاوية والخلايا الوحيدة.

أضف صبغة الفلورسنت القابلة للحياة للتمييز بين الخلايا الميتة ، وكوكتيل الأجسام المضادة المسمى بالفلورسنت لتحديد أنواع الخلايا المختلفة.

ترتبط الأجسام المضادة المترافقة بالفلوروكروم A بعلامات السطح - CD3 على الخلايا التائية ، ومستقبلات الخلايا التائية γδ أو TCR على الخلايا التائية γδ ، و CD56 على الخلايا القاتلة الطبيعية أو الخلايا القاتلة الطبيعية.

ترتبط الأجسام المضادة المترافقة بالفلوروكروم B ب CD4 و CD8 على الخلايا التائية ، و CD19 على الخلايا البائية ، و CD14 على الخلايا الوحيدة.

باستخدام قياس التدفق الخلوي ، حدد المجموعات الفرعية للخلايا الحية.

في حين أن خلايا CD8 ⁺ و CD4 ⁺ T هي خلايا CD3 ⁺ ، تقع خلايا CD4 ⁺ بين خلايا CD3 موجبة مفردة و CD3-CD8 مزدوجة الإيجابية.

γδ تعبر الخلايا التائية عن γδ TCRs و CD3 أعلى مقارنة بخلايا CD4 ⁺ و CD8 ⁺.

الخلايا البائية والخلايا القاتلة الطبيعية هي CD3^- ولكن يتم تحديدها بواسطة CD19 على الخلايا البائية و CD56 على الخلايا القاتلة الطبيعية.

يتم تحديد الخلايا الوحيدة بواسطة تعبير CD14.

لتحضير PBMCs للتلوين ، انقل 100 ميكرولتر من كل عينة إلى لوحة قاع على شكل حرف V سعة 96 بئرا. جهاز الطرد المركزي للوحة عند 350 مرة جم لمدة ثلاث