موسوعة JoVE للتجارب
علم المناعة
0 مشاهدة • 5:58 دقيقة • July 8th, 2025
ابدأ بغطاء زجاجي وظيفي مع جزيئات الذهب النانوية المثبتة على البولي إيثيلين جلايكول.
أضف مجسات شد دبوس الشعر الحمض النووي التي تحتوي على دبوس شعر للحمض النووي مهجن مع اثنين من قليل النوكليوتيدات في أذرع متقابلة.
يشتمل خيط الترابط على فلوروفور وبيوتين ، بينما يحتوي حبلا المرساة على مروي ومجموعة ثيول. في هذا الإعداد ، يمنع المروي الفلورة.
ترتبط مجسات الحمض النووي بجسيمات الذهب النانوية ، وتثبت في الغطاء الزجاجي.
إدخال الستربتافيدين ، الذي يتفاعل مع جزيئات البيوتين في خيوط الترابط.
أضف روابط البيوتينيل التي ترتبط بجزيئات الستربتافيدين المرتبطة مسبقا.
تراكب الغطاء بالخلايا التائية الإيجابية CD8 ؛ تتفاعل مستقبلاتها مع الروابط المجمدة ، وتشكل موقعا للتفاعل بين المستقبلات والترابط.
يولد هذا التفاعل قوة تتكشف عن بنية دبوس شعر الحمض النووي ، وتفصل الفلوروفور عن المروي وتعزز انبعاث التألق.
أدخل خيوط قفل غير فلورية تتفاعل مع الأجزاء غير المطوية من المجسات للحفاظ على إشارة التألق.
تحديد كمية التألق لتقييم قوى المستقبلات التي تطبقها الخلايا المناعية.
للبدء ، ضع أغطية مقاس 25 ملم على رف بولي تترافلورو إيثيلين في دورق سعة 50 مليلتر ، واشطف الغطاء ثلاث مرات عن طريق غمرها في الماء. امزج كميات متساوية من الإيثانول والماء ، وأضف 40 مل من هذا المحلول إلى الدورق الذي يحتوي على الرف والأغطية. ثم أغلق الد
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية