اختبار قائم على CFSE لمراقبة هجرة الخلايا المتغصنة للجلد إلى تصريف الغدد الليمفاوية في الفئران المصابة
موسوعة JoVE للتجارب
علم المناعة
0 مشاهدة • 4:34 دقيقة • July 8th, 2025
خذ فأرا مخدرا. حقن تعليق المتفطرة بوفيس BCG في وسادة القدم الخلفية.
تتعرف الخلايا المتغصنة في الجلد على البكتيريا الفطرية وتوزلها.
علاوة على ذلك ، يتم تقديم مكونات البكتيريا الفطرية المعالجة على جزيئات معقد التوافق النسيجي الكبير من الفئة الثانية.
حقن صبغة CFSE المنفذة للخلية في نفس وسادة القدم.
تشق الإسترازات داخل الخلايا CFSE إلى منتج فلوري غير منفذ للخلايا ، مما يؤدي إلى تلطيخ الخلايا.
علاوة على ذلك ، تهاجر الخلايا المتغصنة المنشطة عبر الأوعية اللمفاوية إلى العقدة الليمفاوية المأبضية ، مما يؤدي إلى تنشيط الخلايا التائية.
قم باستئصال العقدة الليمفاوية المأبضية جراحيا وتجانسها من خلال مصفاة ، والحصول على تعليق أحادي الخلية.
جهاز الطرد المركزي وإعادة تعليق الخلايا في مخزن مؤقت.
نقل الخلايا إلى أنبوب قياس التدفق الخلوي. جهاز طرد مركزي وعلاج الخلايا بكوكتيل الأجسام المضادة.
تمنع الأجسام المضادة التي تحجب FC مستقبلات Fc ، بينما ترتبط الأجسام المضادة الموسومة بالفلوروفور بعلامات السطح CD11c و MHC من الفئة الثانية على الخلايا المناعية.
باستخدام قياس التدفق الخلوي ، حدد الخلايا المتغصنة الجلدية المسماة CFSE ذات تعبير معقد التوافق النسيجي الكبير من النوع الثاني وتعبير CD11c المنخفض ، مما يؤكد هجرتها إلى العقدة الليمفاوية.
بالنسبة لحقن المتفطرة بوفيس BCG ، بعد التأكد من المستوى المناسب من
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية