اختبار لتحديد السالمونيلا العصارية الخلوية والفراغية في البلاعم الأولية المصابة

خذ ثقافة الضامة المشتقة من نخاع العظام. قم بإزالة الوسائط وإضافة بكتيريا السالمونيلا ، معبرة عن بروتين السيتوبلازم الفلوري.

جهاز طرد مركزي لتسهيل ملامسة البكتيريا والبلاعم ، واحتضانه.

ترتبط البكتيريا بمستقبلات البلاعم ، مما يسهل الاستيعاب داخل البلعمة.

يندمج البلعمة مع الحويصلات المشتقة من الجسيمات الداخلية ، وفي نفس الوقت ، تفرز البكتيريا المؤثرات ، وتعيد تشكيل البلعمة إلى فجوة تحتوي على السالمونيلا أو SCV.

تتمزق مجموعة فرعية من SCVs ، وتطلق البكتيريا الداخلية في السيتوبلازم.

أضف مضادا حيويا للقضاء على البكتيريا غير الداخلية. استنشق الوسائط التي تحتوي على البكتيريا الميتة.

أدخل عازلة تحتوي على المنظف ديجيتونين ، الذي يرتبط بالكوليسترول.

يؤدي

ارتباط الديجيتونين بغشاء البلازما الغني بالكوليسترول إلى تكوين المسام ، بينما يظل غشاء SCV الذي يعاني من نقص الكوليسترول سليما - وهي ظاهرة تسمى النفاذية التفاضلية.

أضف الأجسام المضادة ذات العلامات الفلورية التي تدخل الخلايا المنفذة لربط بكتيريا العصارة الخلوية.

استخدم منظفا لتحلل الخلايا و SCVs ، وإطلاق جميع البكتيريا الداخلية.

باستخدام قياس التدفق الخلوي ، حدد بكتيريا العصارة الخلوية مزدوجة اللون والبكتيريا الفجوية أحادية الصبغة.

تلقيح السلالة البكتيرية قبل يوم واحد من الإصابة في 3 ملليلتر من وسط لوريا بيرتاني المكمل بالستربتومايسين والأمبيسل