مقايسة التعلق الفيروسي لفحص المركبات المضادة للفيروسات
موسوعة JoVE للتجارب
علم المناعة
0 مشاهدة • 2:47 دقيقة • July 8th, 2025
ابدأ بلوحة متعددة الآبار تحتوي على طبقة أحادية من خلية الورم الكبدي البشري المبردة مسبقا.
عالج آبار الاختبار بمزيج من فيروس التهاب الكبد C المعدل وراثيا الذي يحمل جين لوسيفيراز والمركب المستهدف ؛ عالج آبار التحكم بالفيروس وحده.
في آبار الاختبار ، تتفاعل الجزيئات المستهدفة مع البروتينات السكرية الفيروسية ومستقبلات سطح الخلية ، مما يمنع الارتباط الفيروسي.
ومع ذلك ، في آبار التحكم ، تتفاعل البروتينات السكرية الفيروسية مع مستقبلات سطح الخلية ، مما يتيح ارتباطها. تمنع درجة الحرارة المنخفضة دخول الفيروس.
قم بإزالة المادة الطافية ، وأدخل وسيطا ، وأعد احتضانها في درجة الحرارة المثلى ، مما يسهل دخول الفيروس.
عند الدخول ، يطلق الفيروس المادة الوراثية ، ويبدأ في تخليق البروتينات الفيروسية وإنزيمات اللوسيفيراز ، التي تفرز في الوسط.
انقل المادة المطافية المحتوية على لوسيفيراز ، وأدخل الركيزة.
ينتج تفاعل الإنزيم والركيزة الضوء بما يتناسب مع مستويات لوسيفيراز.
تشيرشدة الضوء المنخفضة في آبار الاختبار ، مقارنة بآبار التحكم ، إلى الخاصية المضادة للفيروسات للمركب المستهدف.
بالنسبة لمقايسة التعلق الفيروسي ، لوحة 1 × 104 خلايا لكل بئر في صفيحة 96 بئرا ، واحتضانها طوال الليل لربط الخلية. في صباح اليوم التالي ، أولا ، قم بتبريد الصفيحة المكونة من 96 بئرا التي تحتوي على طبقة أحادية الخلية عند 4 درجات مئو
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية