موسوعة JoVE للتجارب
علم المناعة
0 مشاهدة • 2:38 دقيقة • July 8th, 2025
خذ خلايا سرطان الكبد ، واحتضن في درجة حرارة منخفضة لإضعاف الالتقام الخلوي.
إدخال فيروس التهاب الكبد C المؤتلف أو HCV ، والذي يتألف من جينوم RNA مصمم هندسيا يشفر مراسل لوسيفيراز مفرز.
تتفاعل البروتينات الدهنية الفيروسية مع البروتيوغليكان على الخلايا المضيفة ، بينما ترتبط البروتينات السكرية في الغلاف الفيروسي بمستقبلات مضيفة معينة.
في الآبار المختارة ، أضف مركب الاختبار الذي يرتبط بالبروتينات السكرية الفيروسية.
عند الحضانة في درجة حرارة فسيولوجية ، يتم تكسير الفيروسات المرتبطة.
تخلص من الفيروسات غير الداخلية ، وأضف وسائط نمو ، واحتضنها.
في الآبار غير المعالجة ، تساعد البروتينات السكرية في اندماج الجسيم الداخلي للغلاف الفيروسي ، مما يؤدي إلى إطلاق النوكليوكابسيد ، بينما يضعف الإخفاء المركب الاندماج في الآبار المعالجة.
عند إطلاقه ، يعبر الحمض النووي الريبي عن البروتينات الفيروسية ، بما في ذلك لوسيفيراز الذي يفرز خارج الخلية.
احصد المادة الطافية المحتوية على اللوسيفيراز وأضف ركيزة مضيئة بيولوجيا ، والتي تتأكسد بواسطة لوسيفيراز لإصدار الضوء.
يشير انخفاض التلألؤ في الآبار المعالجة مقارنة بالآبار غير المعالجة إلى تثبيط اندماج الغلاف الفيروسي.
لفحص الاندماج الفيروسي ودخوله ، قم بتبريد لوحة زراعة الخلية مسبقا عند 4 درجات مئوية لمدة ساعة واحدة بعد الحضانة الليلية لربط الخلية. قم بإزالة الوسط
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية