موسوعة JoVE للتجارب
علم المناعة
0 مشاهدة • 3:04 دقيقة • July 8th, 2025
ابدأ ب DNAzyme الذي يشق الحمض النووي الريبي ، وهو DNA تحفيزي يتم تنشيطه عند الارتباط بعلامة حيوية بكتيرية معينة.
يرتبط DNAzyme بحبة مغناطيسية مطلية بالستربتافيدين عبر البيوتين في نهايته 5 بوصات. في نهاية 3 '، يرتبط بأورياز مرتبط بقليل النوكليوتيدات ، ويشكل حبة مغناطيسية وظيفية.
إلى أنبوب يحتوي على حبات مغناطيسية وظيفية ، أضف بكتريا قولونية محللة.
علامة حيوية محددة للإشريكية القولونية من المحللة ، تنشط DNAzyme ، مما يؤدي إلى انقسام ارتباط الحمض النووي الريبي ، مما يتسبب في انفصال DNAzyme-urease المترافق.
استخدم حاملا مغناطيسيا لتثبيت الخرزات وإزالة اقتران DNAzyme-urease المرتبط بالخرز.
انقل المادة الطافية المحتوية على اليورياز إلى أنبوب آخر.
أضف صبغة مؤشر الأس الهيدروجيني - أحمر الفينول ومحلول اليوريا.
يحلل اليورياز اليوريا إلى الأمونيا وثاني أكسيد الكربون.
الأمونيا ، وهي قاعدة ضعيفة ، ترفع درجة الحموضة في المحلول ، مما يتسبب في تغيير اللون ، مما يشير إلى وجود العلامة الحيوية للإشريكية القولونية.
بعد تحضير بكتريا قولونية الخلايا وفقا لبروتوكول النص ، اغسل مسبقا أنبوب ميكرو بسعة 1.5 ملليلتر عن طريق إضافة 100 ميكرولتر من RB وتدويرها. ثم تجاهل المخزن المؤقت.
أضف 15 ميكرولترا من EC1 المجمعة إلى الأنبوب المغسول ، ثم ضع الأنبوب على الرف المغناطيسي ، وشفط المادة الطافية. قم بإزالة الأنبوب
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية