طريقة صفيحة ميكروتيتر لتقييم الحد الأدنى للتركيز المثبط للمضاد الحيوي

تناول أطباق ميكروتيتر تحتوي على مضاد حيوي أمينوغليكوزيد مخفف بشكل متسلسل. تحتوي إحدى اللوحات على NTBC ، وهو دواء اصطناعي.

أدخل Pseudomonas aeruginosa ، وهي بكتيريا سالبة الجرام ، واحتضنها.

تنتج البكتيريا البيوميلانين - صبغة واقية خارج الخلية - في الآبار غير المعالجة NTBC ، بينما يمنع الدواء إنتاج البيوميلانين.

يرتبط المضاد الحيوي الكاتيوني بعديدات السكاريد الدهنية الأنيونية ، أو LPS ، على الغشاء الخارجي البكتيري ، مما يؤدي إلى إزاحة الجسور الموجبة وزعزعة استقرار الغشاء.

عند دخول البكتيريا ، يرتبط المضاد الحيوي بموقع الأمينواسيل ، أو الموقع A ، في الوحدة الفرعية الريبوزومية 30S.

يمنع المضاد الحيوي المرتبط ارتباط أمينواسيل-الحمض النووي الريبي وحركة الريبوسومات عبر الرنا المرسال ، مما يتداخل مع تخليق البروتين ويمنع نمو البكتيريا.

بعد الحضانة ، قم بقياس الكثافة البصرية للثقافة لتقييم نمو البكتيريا.

أقل تركيز للمضادات الحيوية يمنع نمو البكتيريا هو الحد الأدنى للتركيز المثبط أو MIC.

تشير قيم MIC المماثلة للآبار المعالجة ب NTBC وغير المعالجة NTBC إلى عدم وجود تأثير ل NTBC على حساسية البكتيريا بالمضادات الحيوية.

قبل يوم واحد من اختبار MIC ، قم بإعداد مزارع السلالات المراد اختبارها في LB مع وبدون 2- [2-nitro-4- trifluoromethyl) benzoyl] -1-3 cyclohexanedione أو NTBC. يستخدم هذا العرض التوضي