موسوعة JoVE للتجارب
علم المناعة
0 مشاهدة • 2:48 دقيقة • July 8th, 2025
ابدأ بعينة تحتوي على فيروس تم الحصول عليها من قرنية خنزير مصابة معالجة بدواء مضاد للفيروسات.
قم بإجراء تخفيف تسلسلي للعينة لإنشاء سلسلة من تناقص تركيزات الفيروس.
التخفيف الأمثل يمنع عدوى خلية واحدة بفيروسات متعددة.
أدخل العينات المخففة إلى طبقة أحادية الخلية المضيفة واحتضنها.
يرتبط الفيروس بمستقبل الخلية المضيفة ، ويدخل الخلية ، ويبدأ في تكاثره. تتحلل الخلية المصابة ، وتطلق الفيروسات.
أضف ميثيل السليلوز ، وهي مادة لزجة تحصر الفيروسات في الخلايا القريبة.
بعد ذلك ، تسبب الفيروسات موت الخلايا وتكوين البلاك في المنطقة المصابة.
أضف الميثانول لإصلاح الخلايا.
استخدم البنفسج الكريستالي لتلطيخ الخلايا الحية.
لاحظ اللويحات كمناطق واضحة تشير إلى الخلايا المصابة وموت الخلايا ، وتحيط بها خلايا غير مصابة ملطخة بالبنفسج الكريستالي.
أخيرا ، احسب عدد اللويحات بأعلى تخفيف لتحديد عيار الفيروس في محلول البداية لتحديد فعالية الدواء المضاد للفيروسات.
لتحديد كمية الفيروس التي تم جمعها من كل قرنية ، قم بإعداد سجل10 تخفيف للفيروس في وسط خال من المصل في أنابيب أجهزة الطرد المركزي الدقيقة حتى يتم الوصول إلى تخفيف 1 × 10-8.
بعد شفط وسط النمو من كل بئر من الخلايا ، انقل 1 مليلتر من كل تخفيف للفيروس ، بدءا من 1 × 10-3 إلى طبقات أحادية الخلية المطلية ، وضع الخلايا المصابة في حاضنة زراعة الخلايا لمدة ساعتين. في ن
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية