اختبار في المختبر لتقييم التأثير المناعي للخلايا الوحيدة على تكاثر الكريات البيض

خذ صفيحة متعددة الآبار مع مزرعة الخلايا الجذعية الوسيطة الملتصقة ، أو MSC.

أضف خلايا الدم المحيطية أحادية النواة ، أو PBMCs ، واحتضنها.

تفرز الخلايا الجذعية الجذعية عامل نمو الخلايا الكبدية ، مما يحفز الخلايا الوحيدة على اكتساب نمط ظاهري معدل للمناعة ، وإنتاج إنترلوكين -10 ، أو IL-10.

انقل المادة الطافية المحتوية على PBMC إلى أنبوب.

أضف حبات مغناطيسية مطلية بالأجسام المضادة ملتصقة بعلامة سطح الخلية الأحادية CD14.

استخدم فاصلا مغناطيسيا لعزل الخلايا الوحيدة CD14 + ، وإضافتها إلى آبار الصفائح متعددة الآبار بتركيزات متزايدة.

إدخال صبغة

الفلورسنت المستجيب CD4 + T المسمى CFSE.

أضف الميكروبيدات المترافقة بالأجسام المضادة المرتبطة على وجه التحديد بعلامات سطح الخلية التائية CD3 و CD28 ، مما يؤدي إلى تنشيط الخلايا.

في السيطرة على الخلايا الوحيدة التي تفتقر إليها جيدا ، تتكاثر الخلايا التائية المنشطة ، مع كل انقسام خلوي يقلل من شدة مضان CFSE في الخلايا الوليدة.

ومع ذلك ، في الثقافات المشتركة ، تفرز الخلايا الوحيدة التي يسببها MSC IL-10 ، مما يثبط تكاثر الخلايا التائية المستجيب.

باستخدام قياس التدفق الخلوي ، لاحظ عددا أقل من الخلايا التائية التي تظهر شدة مضان منخفضة في CFSE مع زيادة تركيزات الخلايا الوحيدة ، مما يشير إلى قمع تكاثر الخلايا التائية المستجيبة بواسطة الخلايا الوحيدة التي يسببها M