موسوعة JoVE للتجارب
علم المناعة
0 مشاهدة • 5:52 دقيقة • July 8th, 2025
خذ غرف التدفق المجمعة مسبقا المتصلة بأنظمة التدفق مع مرشحات transwell: واحدة بها زراعة أحادية البطانية في الأعلى والأخرى مع مزرعة بطانية في الأعلى والخلايا اللحمية في الأسفل.
تتم معالجة كلتا الغرفتين مسبقا بالسيتوكين المؤيد للالتهابات.
في الزراعة الأحادية ، تنشط السيتوكينات الخلايا البطانية ، مما يؤدي إلى تنظيم التعبير عن جزيء الالتصاق.
ومع ذلك ، فإن الحديث المتبادل بين الخلايا اللحمية والبطانية في الزراعة المشتركة يؤدي إلى إنتاج الخلايا اللحمية وسطاء تنظيميين يقلل من تنظيم استجابة الخلايا البطانية للسيتوكينات المؤيدة للالتهابات.
ضع الغرفة على مرحلة مجهر تباين الطور المقلوب.
إدخال تعليق العدلات.
يتم تجنيد العدلات وترتبط بجزيئات الالتصاق البطانية عبر تفاعلات لاصقة عابرة ، مما يسهل تفاعلها مع الكيموكينات المرتبطة بالسطح ، وتدحرج على طول البطانة.
ينشط هذا التفاعل الإنتجرينات الموجودة على العدلات ، مما يؤدي إلى استقرار الالتصاق ويؤدي إلى الانتقال عبر الخلايا البطانية.
ومع ذلك ، في الثقافة المشتركة ، تؤدي الاستجابة البطانية منخفضة التنظيم إلى تجنيد العدلات المكبوتة.
تصور الثقافات تحت الفحص المجهري لتباين الطور لتقييم تجنيد العدلات من التدفق.
بالنسبة لطراز المرشح ، قم أولا بقص قطعة من Parafilm بنفس حجم الغطاء الزجاجي ، باستخدام قالب معدني. بعد ذلك ، قم بقص فتحة 20 × 4 ملم في Parafilm باس
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية