اختبار الالتصاق بالمرحلة الصلبة لتقييم تكوين الأغشية الحيوية

خذ صفيحة مسطحة القاع متعددة الآبار بها آبار تحتوي على بكتيريا في وسط النمو أو بكتيريا في وسط النمو مكملة بالملح الصفروي.

تحفز

الأملاح الصفراوية الإجهاد ، مما يتسبب في تلف الخلايا وإطلاق الحمض النووي والبروتينات. تغطي هذه الجزيئات الحيوية قيعان الآبار ، مما يمكن البكتيريا الباقية من الالتصاق بالسطح الصلب.

تتكاثر البكتيريا المرتبطة ، وتشكل مستعمرات صغيرة وتنتج محفزات ذاتية - أو جزيئات إشارات كيميائية ، مما يسمح بالاتصال البكتيري.

يحفز هذا الاتصال البكتيريا على استعمار وبدء إنتاج المواد البوليمرية خارج الخلية أو EPS ، مما ينتج عنه غشاء حيوي.

بعد الحضانة ، قم بإزالة الوسائط للقضاء على البكتيريا العائمة بحرية.

أدخل صبغة بنفسجية بلورية تتفاعل مع الببتيدوغليكان لجدار الخلية البكتيرية ، مما يمنحها لونا بنفسجيا.

إزالة البقع الزائدة وتجفيف. تراكب بالإيثانول لإذابة البنفسج البلوري من جدار الخلية البكتيرية ، وتغيير لون المحلول.

يؤكد

التلوين الأكثر كثافة في الآبار المعالجة بالملح الصفراوي مقارنة بالآبار غير المعالجة تكوين الأغشية الحيوية من خلال الالتصاق بالطور الصلب.

أولا ، قم بتسمية أنبوبين سعة 1.5 مليلتر باسم TSB و TSB بالإضافة إلى BS. ثم أضف 1 مليلتر من TSB أو TSB بالإضافة إلى BS إلى الأنابيب المعنية.

بعد ذلك ، قم بتلقيح الأنابيب ب 20 ميكرولترا من الثقافة الليلية عند تخفيف 1:50. بعد ذلك ، أ