موسوعة JoVE للتجارب
علم المناعة
0 مشاهدة • 4:37 دقيقة • July 8th, 2025
علاج الثقافات العصبية بتركيزات متزايدة من سم الاختبار.
يدخل السم إلى الخلايا ويتم إطلاقه في العصارة الخلوية.
اعتمادا على إمكاناته ، قد يمنع السم الاندماج الحويصلي ، مما يثبط إطلاق الناقل العصبي.
استبدل الوسط بمخزن مؤقت يحتوي على مركبات دوائية عصبية محددة لمنع إمكانات عمل الخلايا العصبية.
ضع طبق الثقافة على مرحلة الفيزيولوجيا الكهربية. لبدء التسجيل، قم بتوصيل سوما الخلايا العصبية بماصة تحتوي على قطب كهربائي للتسجيل.
قم بتطبيق ضغط سلبي ثابت لشفط جزء غشائي صغير ، لتشكيل جيجاسيل ، وهو ختم محكم يضمن الحد الأدنى من التداخل أثناء التسجيل.
حافظ على جهد غشاء ثابت لقياس التيارات العصبية.
استخدم نبضات الضغط السلبي لتمزق الغشاء ، مما يؤدي إلى إنشاء اتصال مباشر بين الخلايا العصبية والماصة.
سجل التيارات المنتجة في الخلايا العصبية بسبب امتصاص الناقلات العصبية ، والتي تسمى mEPSCs.
يشيرانخفاض تردد mEPSC مع زيادة التعرض للسموم إلى تثبيط إطلاق الناقل العصبي.
يخفف النمط المصلي للسموم العصبية البوتولينوم A إلى 100 مرة التركيز النهائي المطلوب في وسط ثقافة ESN ودافئ إلى 37 درجة مئوية. بعد ذلك ، أضف حجما مناسبا من السم إلى ثقافات DIV 21+ ESN. قم بتدوير طبق الثقافة والعودة إلى الحاضنة.
في النقطة الزمنية المطلوبة ، قم بسحب وسيط ثقافة ESN ، واغسله مرتين باستخدام مخزن التسجيل خارج الخلية أو ERB. ثم, إضافة 4
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية