موسوعة JoVE للتجارب
علم المناعة
0 مشاهدة • 3:22 دقيقة • July 8th, 2025
ابدأ بأنبوب يحتوي على نواقل منفصلة لجينات الأجسام المضادة ثقيلة السلسلة والسلسلة الخفيفة.
أضف كاشف تعداء لتشكيل مجمعات مع المتجهات.
انقل هذا المزيج إلى الخلايا المضيفة للثدييات واحتضانه للاستيعاب.
أضف عاملا مضادا للتكتل لتعزيز التوزيع المتساوي للخلايا المنقولة ، مما يحسن استعادة الخلايا ونموها.
أضف محلولا مضادا للبكتيريا والفطريات لمنع التلوث.
داخل الخلية المضيفة ، تندمج النواقل في جينوم المضيف.
بعد النسخ الجيني ، تخرج mRNAs الفردية من النواة وتخضع للترجمة لتشكيل سلاسل الأجسام المضادة الناشئة.
يؤديالطي والتعديل الصحيح للسلاسل الناشئة إلى سلاسل ثقيلة وخفيفة.
تتحد هذه السلاسل لتشكيل أجسام مضادة تعمل بكامل طاقتها ، والتي يتم إطلاقها بعد ذلك في وسط خارج الخلية.
حصاد الوسط وأجهزة الطرد المركزي. تصفية المادة الطافية.
مرر المرشح عبر عمود تنقية يسمح بالارتباط الانتقائي للأجسام المضادة.
باستخدام مخزن مؤقت للشطف ، قم بإزالة الأجسام المضادة المنقاة.
تنمو خلايا CHO في 200 مل من الوسائط إلى قوارير طويلة محيرة Erlenmeyer. اجمع بين 5 ملليلتر من وسائط CHO الحرة مع 50 ميكروغراما من الحمض النووي المستنسخ الثقيل المتغير و 75 ميكروغراما من الحمض النووي المستنسخ الخفيف المتغير في أنبوب سعة 15 ملليلترا. ثم ، قم بدوامة الأنبوب. اتركي الخليط في درجة حرارة الغرفة لمدة 5 دقائق. أضف 750 ميكرولتر من 1 ملليغر
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية