موسوعة JoVE للتجارب
علم المناعة
0 مشاهدة • 4:51 دقيقة • July 8th, 2025
خذ فأرا محصنا بميتالوببتيداز. احصد الطحال واحصل على تعليق الخلية.
قم بتصفية التعليق من خلال شبكة وجهاز طرد مركزي ، وإزالة بقايا الأنسجة.
تشتمل الخلايا المعزولة على خلايا بائية خاصة بالميتالوببتيداز ، وتنتج أجساما مضادة ضد حواتم الميتالوببتيداز.
أضف خلايا الورم النقوي الخالدة التي تفتقر إلى إنزيم HGPRT ، مما يمنع إنقاذ القواعد النووية لتخليق النيوكليوتيدات. إنهم يعيشون عن طريق تخليق النيوكليوتيدات من جديد.
جهاز طرد مركزي للحصول على الحبيبات والتخلص من المادة الطافية.
أضف PEG واحتضان ، مما يؤدي إلى اندماج خلايا الورم النقوي B لتشكيل أورام هجينة خالدة إيجابية HGPRT.
أضف وسط HAT الذي يتكون من هيبوكسانثين وأمينوبترين وثايميدين. نقل إلى آبار تحتوي على طبقة مغذية من البلاعم البريتونية ، مما يعزز نمو الورم الهجين.
يمنع أمينوبترين تخليق النيوكليوتيدات من جديد ، مما يتسبب في موت خلايا الورم النقوي غير المدمجة. تموت الخلايا البائية غير المدمجة بسبب عمرها القصير.
تنقذ الأورام الهجينة الإيجابية HGPRT سلائف النيوكليوتيدات هيبوكسانثين وثايميدين ، وتتكاثر وتفرز الأجسام المضادة أحادية النسيلة الخاصة بالميتالوببتيداز.
حصاد المادة الطافية لتأكيد إنتاج الأجسام المضادة عن طريق المقايسات النهائية.
للبدء ، قم بحقن 100 ميكروغرام من بروتين APM داخل الصفاق في إناث الفئران البالغة المختارة لتعزيز المستضد الن
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية