مقايسة التنشيط الاصطناعي في المختبر لدراسة تنشيط مستقبلات Fc بواسطة الأجسام المضادة
موسوعة JoVE للتجارب
علم المناعة
0 مشاهدة • 3:32 دقيقة • July 8th, 2025
خذ تعليقا من الخلايا القاتلة الطبيعية ، أو الخلايا القاتلة الطبيعية.
أضف الأجسام المضادة أحادية النسيلة المضادة ل CD20 واحتضنها.
في حالة عدم وجود خلايا سرطانية مستهدفة تعبر عن مستضد CD20 ، ترتبط منطقة Fc من الأجسام المضادة بمستقبلات FcγRIIIa على سطح الخلية القاتلة الطبيعية.
بعد الحضانة ، أضف الوسائط المبردة. أجهزة الطرد المركزي وإزالة الأجسام المضادة غير المرتبطة.
بعد ذلك ، أضف الأجسام المضادة للإنسان κ السلسلة الخفيفة. حضن.
ترتبط هذه الأجسام المضادة الثانوية بالسلسلة الخفيفة κ للأجسام المضادة وحيدة النسيلة.
يحاكي تشابك الجسم المضاد ارتباط المستضد المستهدف ، مما يؤدي إلى سلسلة إشارات داخل الخلايا.
هذا يسبب التحفيز الاصطناعي لخلايا القاتل الطبيعي في حالة عدم وجود خلايا سرطانية.
تخضع الخلايا القاتلة الطبيعية المنشطة لإعادة ترتيب الهيكل الخلوي وتطلق حبيبات سامة للخلايا.
علاوة على ذلك ، تنتج الخلايا الكيموكينات والسيتوكينات.
بعد المدة المطلوبة ، أضف وسائط مبردة لوقف تحفيز الخلية.
الطرد المركزي الأنبوب. اجمع المادة الطافية وحبيبات الخلية لتحليل المصب لوظائف الخلايا الطبيعية المستجيب بوساطة الأجسام المضادة.
قم بتوزيع 100 ميكرولتر من الخلايا القاتلة الطبيعية المعلقة في أنابيب سعة 1.5 ملليلتر أو صفيحة قاع 96 بئرا على شكل حرف U ، وضع الخلايا على الجليد. تحضير ريتوكسيماب أو أي جسم مضاد آخر م
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية