توصيل الأجسام المضادة المعززة بالحمل الحراري إلى دماغ الفأر

قم بتأمين فأر مخدر به شق في خط الوسط في الجمجمة في إطار تجسيمي.

اكتشف البريجما ، وهي نقطة مرجعية على الجمجمة ، وحدد موقع الحقن.

قم بإنشاء ثقب لدغ في الموقع ، وتجنب تلف الأم الجافية التي تغطي الدماغ.

خذ قسطرة خطوة محملة بالأجسام المضادة ، مثبتة على روبوت تجسيمي ، ومتصلة بمضخة تسريب.

تتكون القسطرة من شعرية من السيليكا المنصهرة بارزة من إبرة معدنية ، مما يخلق قطرا خارجيا متدرجا عند نقطة الاندماج.

أدخل القسطرة في حمة الدماغ. ابدأ تشغيل مضخة التسريب لإنشاء تدرج ضغط عند فتحة القسطرة وتوصيل الأجسام المضادة بمعدل متحكم فيه ، وهي تقنية تعرف باسم التوصيل المعزز بالحمل الحراري.

يضغط القطر المتدرج على الأنسجة ، مما يخلق ختما.

يمنع الختم ارتجاع السوائل ويتيح توزيع كميات كبيرة من الأجسام المضادة مع تقليل خطر تلف الأنسجة.

لحقن الأجسام المضادة في مخطط الفئران ، تأكد من عدم الاستجابة لقرصة الجلد في فأر مخدر ، واحلق الرأس باستخدام أداة تشذيب الشعر. تطهير الجلد بمسحات قطنية مبللة بمحلول اليود.

استخدم مشرطا لعمل شق جلدي بطول 10 ملم على طول خط الوسط القحفي عند مستوى العين. قم بتثبيت الماوس في الإطار التجسيمي باستخدام مشبك الأنف وقضبان الأذن ، مع الحرص على أن يكون سطح الجمجمة أفقيا ومؤمنا بإحكام.

ضع المحقنة في الروبوت التجسيمي ، وقم بمزامنة لقمة الحفر مع طرف القسطرة على نقطة مرجعية. استخدم الملقط لسحب الجلد ، وتوطين البريجما على سطح الجمجمة. قم بالإشارة إلى bregma في البرنامج باستخدام طرف لقمة الحفر ، ونقل المثقاب إلى أمامي 1 ملم و 2 ملم جانبي من وضع bregma.

قم بحفر حفرة لدغ ، مع الحرص على عدم إتلاف الأم الجافية ، وحرك المحقنة فوق فتحة الأزيز. قم بتوزيع 0.5 إلى 1 ميكرولتر من المحقنة لضمان عدم ترك فقاعات هواء في القسطرة. ابدأ التوصيل المعزز بالحمل الحراري كما هو موضح ، مع مراقبة سطح الجمجمة بحثا عن أي آثار لتدفق السوائل العكسي من بقعة الحقن.

في نهاية الولادة وإزالة القسطرة ، ابدأ مضخة الحقن بمعدل 0.2 ميكرولتر في الدقيقة للتحقق من وجود دليل على انسداد القسطرة أثناء الحقن. في حالة عدم حدوث انسداد ، يجب ملاحظة قطرة من مزيج الحقن قادمة على الفور من طرف القسطرة.