موسوعة JoVE للتجارب
علم المناعة
0 مشاهدة • 3:52 دقيقة • July 8th, 2025
خذ الفئران جنين الحصين.
أضف التربسين. احتضان للتوسط في انهيار مصفوفة الأنسجة ، وتخفيف خلايا الحصين.
تمييع مع عازلة. احتضن لاستمرار الهضم الأنزيمي مع التربسين.
بعد ذلك ، انقل كتلة الأنسجة إلى أنبوب يحتوي على الوسائط. الماصة بشكل متكرر للتفكك الميكانيكي في خلايا مفردة.
خلايا البذور على أغطية مطلية ببولي إل ليسين داخل ألواح الاستزراع.
حضن. تلتصق خلايا الحصين بالأسطح المطلية. تطور الخلايا العصبية صفيحة وتمتد الأعصاب الثانوية.
علاوة على ذلك ، تنمو الخلايا العصبية مع العمليات المحورية والتغصنية ، وتشكل شبكة عصبية.
الخلايا العصبية الناضجة التعبير عن مستقبلات ضادات متشابك, مستقبلات N-Methyl -D-aspartate, أو NMDARs.
بعد الحضانة ، اغسل أغطية الوسائط.
أضف مصل مريض التهاب الدماغ المناعي الذاتي المخفف. ترتبط الأجسام المضادة الذاتية ب NMDARs العصبية.
اغسل بالعازلة ثم قم بإصلاح الخلايا.
أضف الأجسام المضادة الثانوية المسماة بالفلوروفور والتي ترتبط بالأجسام المضادة الذاتية المرتبطة ب NMDAR.
يغسل مع العازلة. ضع الغطاء فوق وسائط التثبيت التي تحتوي على DAPI لتلطيخ النوى.
يراقب الإشارات الفلورية على الخلايا العصبية مجهريا ، مما يشير إلى وجود أجسام مضادة ذاتية في المصل.
من أجل التفكك الأنزيمي للحصين عند 1 مليلتر من 2.5٪ التربسين في أنبوب 50 مليلتر يحتوي على الحصين ، بعد رفع الحجم في الأنبوب إلى 5 ملليلت
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية