موسوعة JoVE للتجارب
علم المناعة
0 مشاهدة • 4:48 دقيقة • July 8th, 2025
ابدأ بأقراص ورق الترشيح التي تعمل بالأمين واغمرها في الجلوتارالديهايد ، وهو كاشف متقاطع.
يتفاعل الجلوتارالديهايد مع مجموعات الأمين عن طريق تفاعل أمين ألدهيد.
ضع الأقراص في أنبوب. أضف الماء ورجها واستنشقها لإزالة الجلوتارالديهايد المتبقي.
بعد التجفيف ، أدخل الأجسام المضادة الخاصة بالشظايا الخاصة بالغلوبولين المناعي-G-Fc. تتفاعل مجموعات الأمين على هذه الأجسام المضادة مع مجموعات الألدهيد على الأقراص الورقية ، مما يسهل تجميدها التساهمي.
اغسل لإزالة الأجسام المضادة غير المرتبطة وأدخل حاجزا حاجب لمنع الارتباط غير المحدد.
بعد ذلك ، أضف عينة اختبار تحتوي على جزيئات الغلوبولين المناعي G على القرص الورقي. تتفاعل جزيئات الغلوبولين المناعي G مع الأجسام المضادة الملتقطة.
تراكب مع الأجسام المضادة للكشف عن شظوى IgG-Fc المترافقة مع بيروكسيداز الفجل الحار والتي تتفاعل مع الغلوبولين المناعي G المرتبط مسبقا.
يغسل لإزالة الأجسام المضادة غير المرتبطة وإضافة خليط من الركيزة الملونة وبيروكسيد الهيدروجين.
في وجود بيروكسيد الهيدروجين ، يحفز بيروكسيداز الفجل أكسدة الركيزة الكروموجينيكية ، مما يولد لونا أزرق على القرص ، مما يشير إلى وجود الغلوبولين المناعي G.
أضف خمسة ملليلتر من محلول الجلوتارالديهايد بنسبة 0.05٪ إلى زجاجة زجاجية سعة 20 مل. اغمر 15 قرصا من ورق الترشيح متوسط التدفق يعمل بالأمين في هذا المحلول
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية