موسوعة JoVE للتجارب
علم المناعة
0 مشاهدة • 3:31 دقيقة • July 8th, 2025
ابدأ بطبق مزرعة يحتوي على أقسام الصائم الصائمية الثابتة بالفورمالين والمملوءة بالجيلاتين التي تتميز بخلايا الخصل مع الزغابات الدقيقة القمية والسوما على شكل بكرة
يغسل بمحلول احتواء يحتوي على منظف لاختراق أغشية الخلايا.
أضف محلول استرجاع المستضد القلوي. احتضن لكسر روابط البروتين المتشابكة التي يسببها التثبيت ، والكشف عن البروتينات للتلوين.
ضع محلول مانع لمنع ارتباط الأجسام المضادة غير المحدد.
تراكب مع الأجسام المضادة الأولية التي تستهدف بروتينا مرتبطا بالأكتين ، وتحديدا الفسفرة في خلايا الخصل.
إزالة الأجسام المضادة غير المرتبطة. إدخال مزيج من الأجسام المضادة الثانوية المترافقة بالفلوروفور ، والصبغة المرتبطة بالحمض النووي ، وصبغة الفلورسنت الفالويد.
ترتبط الأجسام المضادة الثانوية بالأجسام المضادة الأولية ، وتلصقات صبغة الفلورسنت المتقارنة بالأكتين ، وعلامات الصبغة المرتبطة بالحمض النووي على نوى الخلية.
قم بإزالة المكونات غير المنضومة وأضف مخزن مؤقت خال من المنظفات.
انقل القسم إلى شريحة زجاجية مطلية بمادة لاصقة ، وقم بتثبيتها بالوسائط.
تحت المجهر متحد البؤر ، تشير الخلايا الخضراء على شكل بكرة مع مضان مكثف عند الطرف اللمعي وكتلة جذر حمراء ممتدة إلى وجود خلايا خصلة.
لتحضير أقسام الصائم ، ابدأ بضبط درجة حرارة غرفة ناظم التبريد ودرجة حرارة الجسم على 22 درجة مئوية تحت الصفر. ضع كتلة الأنسجة
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية