إنتاج الأجسام المضادة من ثقافة فرط النمو الدفعي لخلايا الثدييات المنقولة
موسوعة JoVE للتجارب
علم المناعة
0 مشاهدة • 2:29 دقيقة • July 8th, 2025
ابدأ بقارورة تحتوي على خلايا ثدييات منقولة بثبات في وسط خال من المصل مكمل بخافض للتوتر السطحي غير أيوني لمنع تراكم الخلايا.
تحمل هذه الخلايا جيونا معدلا يحتوي على جينات متكاملة ثقيلة وخفيفة السلسلة لإنتاج الأجسام المضادة العلاجية.
أدخل التربتون ، وهو مصدر غني بالمغذيات من الببتيدات والأحماض الأمينية الضرورية لعملية التمثيل الغذائي الخلوي.
تستخدمالخلية هذه الأحماض الأمينية والببتيدات ، وتتكاثر ، مما يؤدي إلى فرط النمو الذي يدعم إنتاجية أعلى للأجسام المضادة.
يؤديالتعبير عن الجينات في الخلايا إلى إنتاج عديد الببتيدات الثقيلة والخفيفة.
في الشبكة الإندوبلازمية ، تنثني هذه السلاسل وتتضاءل عبر روابط ثاني كبريتيد بين السلاسل ، وتشكل أجساما مضادة علاجية.
في جهاز جولجي ، تخضع الأجسام المضادة لتعديلات ما بعد الترجمة. ثم يتم تعبئتها في حويصلات وإطلاقها في الوسط.
احتضان الخلايا لفترة أطول لزيادة إنتاج الأجسام المضادة.
عندما تبدأ صلاحية الخلية في الانخفاض ، احصد المادة الطافية.
قم بتصفية المادة الطافية التي تحتوي على الأجسام المضادة العلاجية وتخزينها في درجة حرارة منخفضة لاستخدامها لاحقا.
خلايا البذور في 2 × 105 خلايا لكل مليلتر في 100 مل من الوسط الخالي من المصل في قارورتين. احتضان الخلايا عند 37 درجة مئوية و 5٪ ثاني أكسيد الكربون عند 120 دورة في الدقيقة لمدة 24 ساعة. إلى المزرعة المكملة بالم
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية