موسوعة JoVE للتجارب
علم المناعة
0 مشاهدة • 4:09 دقيقة • July 8th, 2025
خذ القطع بالتبريد لخزعة الجلد من مريض مرض باركنسون مغلف في وسط تضمين.
يتكون النسيج من بشرة خارجية ، وأدمة كامنة ، ودهون تحت الجلد تعصبها الأعصاب.
اغسل القسم لإزالة وسط التضمين. انقله إلى محلول مانع للنفاذية ، ونفاذية الخلايا وحظر مواقع الارتباط غير المحددة.
اغمر القسم في كوكتيل الأجسام المضادة الأولية لتحقيق وضع علامات موحدة على الأجسام المضادة ، تسمى تلطيخ عائم الحر.
تدخل الأجسام المضادة إلى الخلايا العصبية وترتبط بمجاميع ألفا سينوكلين الموزعة على طول المحاور - وهو شكل مجمع مميز للأمراض التنكسية العصبية - والهيدرولاز الطرفي للكربوكسيل.
إدخال الأجسام المضادة الثانوية المترافقة بالفلوروفور التي ترتبط بالأجسام المضادة الأولية.
عالج بصبغة ربط الحمض النووي الفلورية التي تلطخ النواة.
ضع المنديل على شريحة ، وقم بتطبيق وسيط تثبيت ، وأغلقه بغطاء.
تحت المجهر متحد البؤر ، يكشف التألق من كلا الأجسام المضادة عن وجود مجاميع ألفا سينوكلين على طول محاور الخلايا العصبية الجلدية.
للبدء ، املأ بعض آبار صفيحة 96 بئرا طازجة ب 100 ميكرولتر من محلول الغسيل. انقل الأقسام المراد تحليلها من لوحة التخزين إلى تلك التي تحتوي على محلول الغسيل. اترك الأقسام في محلول الغسيل لمدة 10 دقائق في درجة حرارة الغرفة. ثم انقل كل قسم إلى بئر فارغ يحتوي على نفس محلول الغسيل ، وكرر الغسيل. بعد ذلك ، أضف محلول غسيل إلى الأقس
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية