الكشف عن الأجسام المضادة المضادة للجليكان المنتشرة باستخدام مصفوفة الجليكان المطبوعة
موسوعة JoVE للتجارب
علم المناعة
0 مشاهدة • 4:57 دقيقة • July 8th, 2025
ابدأ بشريحة جليكو وظيفية تتميز بمصفوفات فرعية مطبوعة من الجليكان منظمة في كتل من المصفوفات.
تمثل كل بقعة في المصفوفة الفرعية جليكان مميزا - بوليمر قائم على الكربوهيدرات مع اختلافات في تكوين السكريات الأحادية وطول السلسلة ونمط التفرع.
عالج الرقاقة السكرية بمخزن مؤقت مانع لمنع مواقع التفاعل غير المحددة.
انقل رقاقة الجليكوريب وأدخل مصل الفأر المخفف في مخزن مؤقت مكمل بالفاعل بالسطح لتقليل تراكم الأجسام المضادة. احتضان تحت التحريض.
يعزز التحريض التوزيع المنتظم للمصل ، مما يسهل الارتباط الانتقائي للأجسام المضادة للجليكان بجليكان معينة بناء على الخصائص الجزيئية المميزة.
يغسل بتركيزات متناقصة من محلول حازل يحتوي على مادة خافضة للتوتر السطحي لإزعاج الارتباط والشطف غير المحدد.
تراكب الرقاقة الجليكوتشيب بالأجسام المضادة الثانوية المترافقة مع البيوتين المضاد للفأر ، والتفاعل مع الأجسام المضادة المضادة للجليكان وغسلها.
إدخال الستربتافيدين المسمى بالفلوروفور ، والارتباط بالأجسام المضادة الثانوية الحيوية. اغسل وقم بإزالة المحلول الزائد.
امسح رقاقة الجليكوريب ولاحظ وجود بقع مضان مميزة في مواضع مختلفة مما يشير إلى وجود أجسام مضادة منتشرة خاصة بالجليكان في المصل.
قم بإعداد المخزن المؤقت #1 من خلال المخزن المؤقت #4 كما هو موضح في بروتوكول النص. لتحضير رقائق السكر والعينات ، ضع صندوق التخزين مع الشرائ
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية