موسوعة JoVE للتجارب
علم المناعة
0 مشاهدة • 3:38 دقيقة • July 8th, 2025
خذ شريحة مع آبار التفاعل التي تحتوي على أقسام رقيقة من الأنسجة النباتية المختلفة. يتم تثبيت الأنسجة وتضمينها داخل راتنج للتلوين المناعي.
ضع الشريحة داخل غرفة حضانة مظلمة ورطبة لمنع التعرض للضوء وتبخر الكاشف أثناء الخطوات اللاحقة.
أدخل محلول مانع لمنع تفاعل الأجسام المضادة غير المحدد.
اغسل لإزالة محلول الانسداد الزائد ، ثم أضف الأجسام المضادة الأولية الخاصة بالمستضد واحتضنها.
ترتبط الأجسام المضادة بمستضداتها المستهدفة ، وهي بروتينات أرابينوجالاكتان والبكتين في جدار الخلية.
إدخال الأجسام المضادة الثانوية المترافقة بالفلوروفور ، والتي ترتبط بالأجسام المضادة الأولية.
اغسل لإزالة الأجسام المضادة غير المرتبطة ، وقم بتطبيق صبغة فلورية ترتبط بالسليلوز ، مع وضع علامات على جدار الخلية.
أضف وسيط التثبيت وأغلقه بغطاء غطاء.
تحت المجهر ، يساعد التألق من الصبغة والأجسام المضادة المرتبطة في تصور السليلوز في جدران الخلايا النباتية المتوضعة مع بروتينات أرابينوجالاكتان أو البكتين ، مما يدل على توزيعها الخاص بالأنسجة.
لتحضير غرفة حضانة لشرائح التفاعل ، ضع بعض المناشف الورقية المبللة في الجزء السفلي من صندوق أطراف الماصة ولف الصندوق بورق الألمنيوم. انقل الشرائح من الصندوق إلى غرفة الحضانة. ماصة 50 ميكرولتر من محلول الحجب في كل بئر. بعد احتضان الشريحة لمدة 10 دقائق ، قم بإزالة محلول الحظر. ثم اغسل جميع
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية