موسوعة JoVE للتجارب
علم المناعة
0 مشاهدة • 4:05 دقيقة • July 8th, 2025
ابدأ بأنبوب يحمل جزيئات مرتبطة بالغشاء مشتقة من الخلايا تسمى الحويصلات خارج الخلية ، أو EVs ، والتي تظهر تركيبات مستضدية فريدة.
إدخال الجسيمات النانوية المغناطيسية ، MNPs ، التي تحتوي على أجسام مضادة ملتقطة مترافقة مع شظايا Fab ذات العلامات الفلورية.
احتضان لتسهيل التفاعل بين MNPs مع مستضدات معينة من المركبات الكهربائية ، وتشكيل مجمعات MNP-EV.
أضف الغلوبولين المناعي-G لمنع مواقع ربط Fc ، ثم أدخل أجساما مضادة للكشف ذات علامات فلورية لتلطيخ المستضدات الأخرى على الجسيمات الملتقطة.
قم بتحميل هذا الخليط على عمود مغناطيسي مغسول مسبقا يوضع في فاصل مغناطيسي.
يحتفظ المجال المغناطيسي بالجسيمات التي تم التقاطها بواسطة MNP داخل العمود. تبادل المخزن المؤقت لإزالة الأجسام المضادة غير المرتبطة.
استرجع العمود من الفاصل المغناطيسي ، وقم بإزالة الجسيمات التي تم التقاطها بواسطة MNP بمخزن مؤقت ، وقم بإصلاحها للحفاظ على سلامتها الهيكلية.
تحليل الجسيمات المناعية عن طريق قياس التدفق الخلوي ؛ ترتبط إشارات التألق المميزة من المستضدات الملطخة بالخصائص المستضدية الفريدة للمركبات الكهربائية.
ابدأ بالجمع بين 60 ميكرولترا من MNPs لكل حالة و 5 ميكرولترات من شظايا Fab المصنفة الخاصة بالنمط المتماثل للجسم المضاد الملتقط محل الاهتمام في أنبوب الطرد المركزي الدقيق سعة 1.5 ملليلتر. احتضان المحلول في درجة حرارة الغرفة
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية