اختبار مناعي متعدد الإرسال قائم على الخرزة لتحديد أهداف السيتوكين المتعددة

0 views • 4:49 min • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

خذ صفيحة متعددة الآبار مع مرشحات في القاعدة.

أضف عينة اختبار تحتوي على سيتوكينات مختلفة.

أضف مجموعات مختلفة من الكريات المجهرية متباينة حسب الحجم وشدة التألق الداخلي.

يتم اقتران كل مجموعة مع جسم مضاد يستهدف سيتوكين معين.

احتضان اللوحة في الظلام تحت التحريض.

ترتبط الأجسام المضادة بالسيتوكينات المستهدفة ، مما يؤدي إلى جملتها على الكريات المجهرية.

ضع مكنسة كهربائية لإزالة السيتوكينات غير المرتبطة. يتم الاحتفاظ بالسيتوكينات المرتبطة بالكرة المجهرية بسبب حجم المسام الأصغر للغشاء.

أضف مزيجا من الأجسام المضادة للكشف المترافق مع البيوتين التي ترتبط بالسيتوكينات المرتبطة بالكرة المجهرية.

أضف ستربتافيدين مترافق بالفلورسنت واحتضانه في الظلام تحت التحريض. يرتبط الستربتافيدين بالبيوتين ، مما يؤدي إلى شل حركة المراسل على مركب الكرة المجهرية.

قم بإزالة الجزيئات غير المرتبطة وإعادة تعليق المجهرية.

باستخدام قياس التدفق الخلوي ، حدد السيتوكينات المرتبطة عن طريق تحديد الحجم والتألق الداخلي للكريات المجهرية.

لتحديد كمية السيتوكين المعين ، قم بقياس شدة مضان المراسل.

لإجراء الفحص ، اترك جميع الكواشف تسخن إلى درجة حرارة الغرفة قبل الاستخدام.

تستخدم ألواح ترشيح البولي بروبلين في هذا العرض التوضيحي. من الضروري للغاية أن تظل اللوحة منتصبة أثناء إجراء الفحص بأكمله ، بما في ذلك خطوات الغسيل ، لتجنب فقدان الخرز.

قم ببلل ورق الترشيح مسبقا عن طريق إضافة 100 ميكرولتر من مخزن الغسيل 1x إلى كل بئر ، واترك اللوحة لمدة دقيقة واحدة في درجة حرارة الغرفة. قم بإزالة حجم المخزن المؤقت باستخدام مشعب التفريغ. امسح عازلة الغسيل الزائدة من أسفل اللوحة عن طريق الضغط على اللوحة على كومة من المناشف الورقية النظيفة. ثم ضع اللوحة فوق غطاء اللوحة المقلوب.

بالنسبة لعينات الطاف لزراعة الخلايا ، أضف 25 ميكرولترا من مخزن الفحص إلى جميع الآبار. أضف 25 ميكرولترا من كل معيار إلى الآبار القياسية. أخيرا ، أضف 25 ميكرولترا من كل عينة إلى آبار العينة. دوامة الخرز المختلطة لمدة 30 ثانية. ثم أضف 25 ميكرولترا من الخرز المختلط إلى كل بئر ، مع رج زجاجة الخرزة بشكل متقطع لتجنب استقرار الخرز.

أغلق اللوحة باستخدام مادة مانعة للتسرب من الألواح. بمجرد إغلاقها ، لف اللوحة بأكملها ، بما في ذلك غطاء اللوحة المقلوب ، بورق الألمنيوم. ضع اللوحة على شاكر اللوحة ، وثبتها ، ورجها عند حوالي 500 دورة في الدقيقة لمدة ساعتين في درجة حرارة الغرفة. بدون قلب ، ضع اللوحة على مشعب الفراغ وقم بتطبيق الفراغ كما كان من قبل. ثم أضف 200 ميكرولتر من مخزن الغسيل 1x إلى كل بئر.

قم بإزالة محتويات آبار لوحة الفحص عن طريق الترشيح الفراغي. امسح عازلة الغسيل الزائدة من أسفل اللوحة باستخدام وسادة ماصة أو مناشف ورقية قبل تكرار هذه الخطوة مرة أخرى. بعد ذلك ، أضف 25 ميكرولترا من الأجسام المضادة للكشف إلى كل بئر. بعد إغلاق اللوحة باستخدام مادة مانعة للتسرب جديدة ، قم بلف اللوحة بأكملها ، بما في ذلك غطاء اللوحة المقلوب ، بورق الألمنيوم.

ضع الطبق على شاكر اللوحة ورجه عند حوالي 500 دورة في الدقيقة لمدة ساعة واحدة في درجة حرارة الغرفة. بدون تنظيف بالمكنسة الكهربائية ، أضف 25 ميكرولترا من كاشف الستربتافيدين فيكوريثيرين مباشرة إلى كل بئر. أغلق الطبق ولفه كما كان من قبل. ثم. ضع الطبق على شاكر الطبق ورجه بسرعة 500 دورة في الدقيقة تقريبا لمدة 30 دقيقة في درجة حرارة الغرفة.

بعد تكرار خطوة الترشيح الفراغي مرتين ، أضف 200 ميكرولتر من مخزن الغسيل 1x إلى كل بئر. أعد تعليق الخرز على شاكر الطبق لمدة 1 دقيقة. باستخدام ماصة متعددة القنوات، انقل العينات من لوحة المرشح إلى أنابيب FACS لقراءة العينات على مقياس التدفق الخلوي.

09:22

حبة على أساس مقايسة متعدد لتحليل الملامح سيتوكين المسيل للدموع

Related Videos

0 Views

07:08

سريع، متعدد المراسل المزدوج IgG وIgM سارس-CoV-2 تحييد المقايسة لنظام تحليل التدفق متعددة الخرز القائم

Related Videos

0 Views

08:48

المراقبة الديناميكية للتحويل المصلي باستخدام فحص الخرز المناعي متعدد التحليلات ل Covid-19

Related Videos

0 Views

14:48

تحويل لالتقاط ELISA لفحص xMAP Luminex باستخدام فحص الجسم المضاد الطريقة ملتيبليكس

Related Videos

0 Views

04:45

مقايسة الخبعة المناعية متعددة التحليلات: تقنية المقايسة المناعية القائمة على التدفق للكشف المتزامن عن أنواع فرعية متعددة من الأجسام المضادة في عينة المصل البشري

Related Videos

0 Views

04:46

فحص متعدد الإرسال قائم على الخرزة لتحليل السيتوكينات في عينات الدموع البشرية

Related Videos

0 Views

11:00

متعدد سيتوكين التنميط من سبلينوسيتيس الماوس حفز استخدام منصة المستندة إلى حبة سيتوميتريك المناعة

Related Videos

0 Views

08:26

التنمية والتحقق من جزيء واحد أولتراسينسيتيفي الصفيف الرقمي المرتبط بالانزيم مقايسة الممتز للبشرية انترفيرون-α

Related Videos

0 Views

06:37

استخدام الكواشف المرجعية لتأكيد متانة فحوصات إطلاق السيتوكين للتنبؤ بسلامة الأجسام المضادة وحيدة النسيلة

Related Videos

0 Views

05:25

الكشف المتزامن عن فئات مختلفة من الأجسام المضادة في اختبار مصلي متعدد الإرسال

Related Videos

0 Views

Last updated: 1 August 2026