تقنية Snap Chip لاختبار مناعي شطيرة متعدد الإرسال خال من التفاعل المتقاطع
موسوعة JoVE للتجارب
علم المناعة
0 مشاهدة • 4:36 دقيقة • July 8th, 2025
ابدأ بتجميع شريحة فحص المصفوفة الدقيقة المعالجة مسبقا مع بقع مميزة تحتوي على أجسام مضادة خاصة بالبروتين للكشف عن البروتين المتعدد.
قم بتحميل تخفيفات معيار البروتين وعينات المصل المخففة مسبقا في آبار منفصلة. تخلق هذه التخفيفات مجموعة من تركيزات البروتين لتقدير دقيق كميا.
احتضان لتسهيل تفاعلات البروتين والأجسام المضادة. اغسل لإزالة البروتينات غير المرتبطة وتفكيك وتجفيف الشريحة.
اقلب شريحة الفحص في جهاز كبس يحتوي على شريحة نقل مرطبة مرقطة بأجسام مضادة للكشف عن البيوتينيل الخاصة بالبروتين في نفس مواضع شريحة الفحص.
أغلق الجهاز واضغط لالتقاط الشرائح فوق بعضها البعض. هذا يسهل نقل الأجسام المضادة للكشف إلى النقاط المقابلة على شريحة الفحص ، مما يقلل من التفاعل المتبادل.
افصل الشرائح للسماح بتفاعل الأجسام المضادة للكشف مع البروتينات المرتبطة ، وتشكيل مجمعات مناعية.
أعد تجميع شريحة الفحص ، واشطفها ، وأدخل الستربتافيدين المترافق بالفلوروفور ، ويتفاعل مع الأجسام المضادة البيوتينيل.
باستخدام ماسح ضوئي ، اكتشف بقع التألق في مواقع مختلفة ، مما يشير إلى بروتينات متعددة في عينة المصل. قارن شدة البقعة مع معيار القياس الكمي للبروتين.
لبدء المقايسة المناعية ، قم بإزالة شريحة الفحص المحضرة من الفريزر واتركها تسخن إلى درجة حرارة الغرفة في كيسها المغلق لمدة 30 دقيقة. قم بإعداد سبعة محاليل مخففة بشكل متسلس
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية