موسوعة JoVE للتجارب
علم المناعة
0 مشاهدة • 5:19 دقيقة • July 8th, 2025
ابدأ بشريحة تحتوي على خلايا مضيفة ملتصقة.
أضف الفيروسات واسمح لها بالدخول إلى الخلايا المضيفة.
قم بإزالة الوسط المستهلك. أضف وسيطا جديدا لتمكين تخليق البروتين الفيروسي ونقله.
استخدم بارافورمالدهيد للحفاظ على مورفولوجيا الخلية وموقع البروتين.
أضف جزيئات المنظفات لجعل الخلايا قابلة للنفاذ.
تطبيق مخزن مؤقت للحظر لحظر مواقع الربط غير المستهدفة.
أضف الأجسام المضادة الأولية التي تربط البروتينات الفيروسية المستهدفة. إزالة الأجسام المضادة غير المرتبطة.
تراكب مع الأجسام المضادة الثانوية المترافقة بالفلوروفور الأحمر لوضع علامات على البروتينات الفيروسية بالفلورسنت. إزالة الأجسام المضادة غير المرتبطة.
أضف وسيط تركيب يحتوي على صبغة نووية فلورية لتلطيخ النوى.
باستخدام الفحص المجهري متحد البؤر ، راقب موقع البروتينات الفيروسية ذات الفلورسنت الأحمر والنوى المضيفة الفلورية الزرقاء.
تشيرالإشارة الحمراء الأقوى حول المنطقة الزرقاء إلى توطين السيتوبلازم ، بينما تشير الإشارة الأقوى من الداخل إلى التوطين النووي.
تشير مستويات الإشارة المتساوية في المنطقة الزرقاء وحولها إلى أن البروتينات موجودة في كل من النواة والسيتوبلازم.
قبل 20 إلى 24 ساعة من الإصابة بالفيروس ، قم بزرع 5 × 104 خلايا الخلايا الليفية الجنينية البشرية أو خلايا الخلايا الليفية HEL لكل بئر على شريحة متداخلة من 4 آبار 11 ملم في وسط النمو للحض
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية