قياس كفاءة البلعمة في البلاعم باستخدام العلاج الديناميكي والضوئي

ابدأ بصفيحة متعددة الآبار تحتوي على ضامة الفئران الملتصقة - أو الخلايا المناعية البلعمة.

إدخال تعليق الخلايا الفطرية للمكورات المستخفية ، والتفاعل مع مستقبلات البلاعم واستيعابها عن طريق البلعمة.

يندمج البلعمة مع الجسيم الليزومي ، مكونا البلعمة. تفضل البيئة الحمضية للبلعمة بقاء الفطريات وتكاثرها.

أدخل تركيزا عاليا من بريماكين - محسس للضوء ، إلى آبار الاختبار ، بينما يفتقر عنصر التحكم إلى المحسس الضوئي. احتضان لتسهيل امتصاص البلاعم بريماكين.

قم بتعريض اللوحة للأشعة فوق البنفسجية للعلاج الضوئي أو PDT.

في بئر الاختبار ، يشكل بريماكين كاتيونات جذرية تتفاعل مع الأكسجين الجزيئي ، وتنتج أنواع الأكسجين التفاعلية ، أو ROS.

يؤدي

ROS إلى موت الفطريات ، بينما تعمل الإنزيمات المضادة للأكسدة من الضامة على تحييد ROS ، مما يمنع تلف الخلايا.

نفاذية البلاعم ، وإطلاق الخلايا الفطرية.

انشر محتويات الخلايا المخففة على ألواح أجار انتقائية ، مما ينتج عنه مستعمرات فطرية مميزة.

يشير

عدد أقل من المستعمرات على لوحة الاختبار مقارنة بعنصر التحكم إلى الكفاءة البلعمية الملحمة المحسنة بسبب المعالجة الضوئية الديناميكية بالبريماكين.

ابدأ بتعليق خط خلية البلاعم الفئران في وسط RPMI 1640 الكامل كما هو مذكور في بروتوكول النص. قم بتوزيع 100 ميكرولتر من معلق الخلية هذا في آبار صفيحة ثقافة معقمة ذات قاع مسطح 96 بئرا. احتضن