الكشف الكمي عن البكتيريا المتعددة باستخدام الكريات المجهرية المغناطيسية ذات العلامات الصبغية

خذ لوحة فحص تحتوي على خليط من كريات البوليسترين المغناطيسية المصبوغة داخليا بفلوروفورات مختلفة طيفيا.

تقترن كل مجموعة كرية تساهمية بأجسام مضادة خاصة بالبكتيريا المسببة للأمراض متميزة.

أضف خليطا بكتيريا مسببة للأمراض مقتولة بالحرارة. حضن.

تربط الأجسام المضادة الملتقطة المستضدات البكتيرية المستهدفة ، وتشكل مجمعات بكتيريا مجهرية.

استخدم فاصلا مغناطيسيا لتسوية المجمعات. تخلص من البكتيريا غير الملزمة واغسلها بالعازلة.

أضف الأجسام المضادة للكشف عن المخزن المؤقت والحيوي ، والتي ترتبط على وجه التحديد بالبكتيريا المرتبطة بالكرة المجهرية.

افصل المجمعات مغناطيسيا واغسلها بالعازلة.

قم بإعادة تعليق المجمعات في المخزن المؤقت. جزيئات مراسل الماصة التي تتكون من الستربتافيدين المقترن بالفلوروفور ، والتي ترتبط بالأجسام المضادة للكشف عن البيوتينيل.

افصل مغناطيسيا واغسل المجمعات. إعادة التعليق في المخزن المؤقت.

أثناء التحليل القائم على التدفق ، يثير الليزر الأول الفلوروفورات الداخلية للكرة المجهرية ، مما يولد توقيعات طيفية فريدة ويحدد مجموعات الكرة المجهرية الفريدة.

يثير الليزر الثاني مراسلي الفلوروفور المرتبطين بالبكتيريا على الكريات المجهرية ، مما يؤدي إلى تحديد البكتيريا على مجموعات مجهرية مختلفة ، مما يتيح الكشف الكمي عن البكتيريا المتعددة.

لالتقاط العينات ، ابدأ بإضافة خمسين ميكرولترا من الكريات