فحوصات للتقييم النوعي والكمي لتركيزات الجلوكوز في بول الفئران

خذ قطرة من بول الفأر الطازج واغمر شريط الكشف عن الجلوكوز الذي يحتوي على الجلوكوز أوكسيديز والبيروكسيداز والكروموجين.

يؤكسد الجلوكوز أوكسيديز جلوكوز البول ، ويشكل الجلوكونولاكتون وبيروكسيد الهيدروجين.

علاوة على ذلك ، يستخدم البيروكسيديز بيروكسيداز الهيدروجين لتحفيز أكسدة الكروموجين ، وتشكيل منتج ملون ، بكثافة تتناسب مع تركيز الجلوكوز في البول.

قارن اللون مع المخطط المرجعي للشريط للتقييم النوعي لجلوكوز البول.

لقياس نسبة الجلوكوز الكمي في البول ، خذ صفيحة متعددة الآبار مع معايير تركيز الجلوكوز وعينة بول الفأر التي تم جمعها خلال فترة محددة.

أضف خليط الفحص الذي يحتوي على أوكسيديز الجلوكوز والبيروكسيداز وكواشف اقتران المؤشر.

يسهل أوكسيديز الجلوكوز أكسدة الجلوكوز ، ويشكل الجلوكونولاكتون وبيروكسيد الهيدروجين. يحفز البيروكسيديز التفاعل بين كواشف الاقتران وبيروكسيد الهيدروجين ، مكونا منتجا ورديا اللون.

باستخدام قارئ الألواح الدقيقة ، قم بقياس امتصاص المنتج الملون.

باستخدام منحنى الجلوكوز القياسي المتولد ، حدد تركيز الجلوكوز في البول.

ابدأ بوضع قطعة من البارافيلم النظيف على سطح مستو. التقط الماوس برفق من الذيل وضعه على البارافيلم.

كبح جماح الماوس عن طريق القفظة باستخدام الإبهام والسبابة ، مما يتسبب في تبول الماوس كرد فعل على الإجهاد. اترك قطرة من البول تسقط على سطح البارافيلم ثم أعد الفأر إلى قفصه.

اغمس طرف الكاشف لشريط الكشف عن الجلوكوز في قطرة البول الطازجة. قم بإزالة الشريط على الفور وضعه بشكل مسطح على سطح مع وضع جانب اللون لأعلى. ثم انتظر 30 ثانية على الأقل حتى يتطور اللون بالكامل على الشريط. قارن اللون المطور مع المخطط المرجعي المقدم من الشركة المصنعة.

قم بتجميع القفص الأيضي وفقا لتعليمات الشركة المصنعة ، واملأ مجموعة العلف بمسحوق الطعام ، ثم قم بتثبيته بعلامة التبويب المعدنية المناسبة في الغرفة العلوية.

قم بتثبيت دعامة زجاجة الماء في اللسان المعدني المتبقي في الغرفة العلوية. املأ زجاجة الماء الفارغة وحركها في دعامة الزجاجة ، وتأكد من وجود أنبوب الشرب في الحفرة.

ضع فأرا واحدا في القفص الأيضي وقم بتغطيته بالغطاء ، مع التأكد من تركيب غطاء القفص بشكل صحيح. ضع أنبوب جمع البول وأنبوب جمع البراز في أماكنهما في أرضية الغرفة السفلية.

بعد 24 ساعة ، استرجع أنبوب جمع البول وقم بإجراء فحص الجلوكوز لتحديد تركيز الجلوكوز في البول. إذا لم يتم إجراء فحص الجلوكوز في نفس اليوم ، فقم بتجميد عينة البول في ثلاجة 80 درجة مئوية تحت الصفر.

إذا كنت تستخدم عينة بول مجمدة ، فقم بإذابة الثلج أولا. قم بإعداد ثمانية معايير تتراوح من 25 إلى 0 ملليغرام لكل ديسيلتر ، وفقا لتوجيهات مجموعة الفحص.

قم بإعداد الآبار القياسية وآبار عينات البول في طبق سعة 96 بئرا ، كل ذلك في نسخ مكررة ، وفقا لدليل المجموعة. ابدأ التفاعل بإضافة الكمية الموصى بها من خليط الإنزيم إلى جميع الآبار. غطي الطبق واتركيه يحتضن لمدة 10 دقائق عند 37 درجة مئوية. بعد ذلك ، اقرأ الامتصاص عند 500 إلى 520 نانومتر باستخدام قارئ لوحة.

قم بتحليل البيانات وفقا لتعليمات مجموعة الفحص ورسم امتصاص كل معيار مقابل تركيز الجلوكوز. استخدم هذا الرسم البياني لتحديد تركيز الجلوكوز في عينة البول لمدة 24 ساعة. إذا كان تركيز البول خارج النطاق القياسي، فقم بتخفيف عينة البول.