تعزيز التنبيغ الفيروسي في الخلايا القاتلة الطبيعية باستخدام بوليمر كاتيوني
موسوعة JoVE للتجارب
علم المناعة
0 مشاهدة • 4:21 دقيقة • July 8th, 2025
خذ الخلايا القاتلة الطبيعية ، أو NK. أضف ناقلات الفيروسات العدسية التي تشتمل على إنزيمات فيروسية وجزيئات الحمض النووي الريبي الهندسية التي تشفر بروتين الفلورسنت.
أضف البوليمرات الموجبة وترسيب الخلايا والفيروسات.
تعملالبوليمرات على تحييد الشحنات السالبة على كل من الفيروس والخلية ، مما يسهل اندماج الغشاء.
يتم نسخ الحمض النووي الريبي بشكل عكسي إلى الحمض النووي ودمجه في جينوم المضيف ، مما يتيح التعبير عن البروتين الفلوري.
أضف وسائط مكملة بالسيتوكين إنترلوكين -2 ، أو IL-2.
يؤديIL-2 إلى تشغيل الإشارات داخل الخلايا التي تعزز بقاء الخلايا القاتلة الطبيعية وتكاثرها مع الحفاظ على التعبير الجيني المعدل وراثيا.
انقل الخليط إلى مغطى جيدا بالأجسام المضادة التي ترتبط بمستقبلات مناعية معينة على الخلايا القاتلة الطبيعية ، مما يؤدي إلى إطلاق السيتوكينات المضادة للفيروسات.
حدد كمية السيتوكينات المنبعثة لتقييم تأثير البوليمر على إنتاج السيتوكين.
أضف أصباغ الفلورسنت لتسمية الحمض النووي للخلايا النخرية.
باستخدام قياس التدفق الخلوي ، حدد الخلايا الحية وحدد إشارة البروتين الفلوري لقياس كفاءة التنبيغ الناجم عن البوليمر.
قم بتعليق الخلايا المزروعة أو الخلايا الطبيعية الأولية البشرية في آبار صفيحة مكونة من 24 بئرا عند 0.5 × 105 لكل مليلتر من الوسط مع طاف فيروس العدسات GFP في MOY من 5 و 10 و 20 وفي وجود الب
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية