مارس 29, 2013
العملية الجراحية المستخدمة للحث على احتشاء عضلة القلب التجريبية في الفئران يبدأ بضع الصدر الأيسر بين الثالث والرابع في الأضلاع أجل رؤية سطح الأمامي للقلب والرئة اليسرى. وligated التاجي الأيسر الشريان، يتم إغلاق الصدر ويسمح الماوس لاسترداد تلقائيا.
الهدف العام من هذا الإجراء هو إحداث احتشاء في عضلة القلب لدى الفئران. ويتم تحقيق ذلك أولاً عن طريق إجراء شق جلدي على طول الخط الإبطي المتوسط. بعد ذلك، يتم كشف القلب عن طريق إجراء عملية بضع صدر يسارية بين الضلعين الثالث والرابع.
ثم يتم إجراء ربط عند الجزء القريب من الشريان الأمامي النازل الأيسر. وأخيرًا، يتم إغلاق الصدر وإعادة الفأر إلى القفص للتعافي التلقائي. وفي النهاية، يمكن فحص احتشاء عضلة القلب عن طريق تخطيط كهربائية القلب أو تخطيط صدى القلب.
يُعد العرض المرئي لهذه الطريقة أمراً بالغ الأهمية نظراً لصعوبة تعلم ربط الشريان التاجي بالقرب من الجانب الأيسر. ويتم ضمان حدوث احتشاء عضلة القلب بشكل كافٍ عن طريق وضع الرباط أسفل فتحة الشريان الأيسر مباشرةً. ولكن من المهم عدم ثقب الشريان الأورطي الصاعد، لأن ذلك قد يؤدي إلى نزيف مميت.
لبدء الجراحة، يتم تخدير فأر يبلغ من العمر ستة أسابيع أو أكثر عن طريق الاستنشاق باستخدام 2 إلى 5% من الفلورين. يتم إجراء قرصة لإصبع القدم للتأكد من أن الحيوان مخدر بشكل كافٍ. وبمجرد تخدير الفأر تماماً، يُنقل إلى منطقة الجراحة ويوضع على.
يُعاد وضعه على وسادة تدفئة. وللحفاظ على درجة حرارة ثابتة تبلغ 37 درجة Celsius، يتم تثبيت الفأر في جهاز تنبيب باستخدام غرفة تعريض لغاز isof fluorine عبر أنبوب بقطر 0.2 centimeter ومزيج من 2% isof fluorine في الهواء. ثم يُدخل الأنبوب في رغامي الفأر.
قم بحلاقة منطقة الصدر أمام القلب في الجانب الأيسر، ثم قم بتطهير المنطقة باستخدام Betadine، تليها عملية التطهير بـ 75% ethanol ثلاث مرات لكل منهما. كذلك، ضع مرهم العيون على عيني الفأر باستخدام مقص معقم.
أحدث شقاً بطول 1.5 centimeter على طول الخط الإبطي المتوسط. يسهل هذا النهج التقييم اللاحق بتخطيط صدى القلب. تُستخدم المقصات بدلاً من المشرط لتجنب إصابة الأنسجة الكامنة في هذه الفئران الصغيرة.
بعد ذلك، باستخدام ملقط أوعية ذو طرف غير حاد، قم بفصل وعزل العضلة أمام القلب عن جدار الصدر. أجرِ عملية بضع الصدر الأيسر بين الضلعين الثالث والرابع لرؤية السطح الأمامي للقلب والرئة اليسرى. علاوة على ذلك، قم بإبعاد جدار الصدر باستخدام مباعد أجفان مناسب.
من أجل تحسين الرؤية وسهولة الوصول باستخدام ملقط الأسنان ومقص ذو طرف غير حاد، قم بإزالة التأمور. بعد ذلك، جهز خيط جراحي من نوع lon بمقاس 7/0 وإبرة لربط الشريان. قم بربط الشريان التاجي الأيسر عن طريق وضع الإبرة أسفل الشريان مع ترك شريط من عضلة القلب بين الرباط والشريان.
أغلق القفص الصدري بوضع غرزتين على الضلعين الثالث والرابع. خفّض تركيز isof fluorine إلى 0.5% واستخدم خيوط جراحية من نوع five zero ethylene لإغلاق الجلد بثلاث غرز. ولتسكين الآلام بعد الجراحة، قم بإعطاء حقنة داخل الصفاق من buprenorphine بجرعة 0.05 milligrams per kilogram.
أخيراً، ضع الفأر في قفص دافئ للتعافي التلقائي مع توفير 0.6 mg/mL من buprenorphine في مياه الشرب. راقب الفأر بدقة خلال الـ 24 ساعة الأولى بعد الجراحة لاستقصاء آثار احتشاء عضلة القلب. وتعد أفضل طريقة غازية لتقييم وظيفة القلب هي استخدام تخطيط صدى القلب بعد عدة أيام من الجراحة.
باستخدام هذا البروتوكول، يؤدي ربط الشريان التاجي الأيسر إلى إحداث نقص تروية عضلة القلب يشمل حوالي 40% من البطين الأيسر. وهذا يؤدي إلى تغييرات ملحوظة في قطاع ST في تخطيط كهربائية القلب (ECG)، كما هو موضح في تخطيطات كهربائية القلب التمثيلية هذه التي تم قياسها قبل الربط وبعده. قبل حدوث احتشاء عضلة القلب.
تكون مركبات QRS المسجلة بواسطة تخطيط كهربائية القلب (ECG) ضيقة وقصيرة. بعد احتشاء عضلة القلب، يظهر ارتفاع واضح في قطعة ST يكون منغمساً في مركبات QRS، مما يجعل مركبات QRS أعرض وأطول بكثير من تلك التي تم تسجيلها قبل احتشاء عضلة القلب. وللتحقيق في آثار احتشاء عضلة القلب، يتم تقييم وظائف القلب باستخدام تخطيط صدى القلب بعد عدة أيام من عملية احتشاء عضلة القلب.
يظهر هنا تسجيل لتخطيط صدى القلب مأخوذ من فئران خضعت لعملية وهمية. وبخلاف الانقباضات القلبية الجيدة التي شوهدت في الفئران التي خضعت للعملية الوهمية، وفي الفئران المصابة باحتشاء عضلة القلب (MI).
بعد مرور 72 ساعة من احتشاء عضلة القلب (mi)، يظهر خمول حركي (akinesia) ملحوظ في الجدار البطيني الأيسر الحر خلال المرحلة الانقباضية. بعد مشاهدة هذا المقطع، يجب أن يكون لديك فهم جيد لهذا النموذج الفأري لاحتشاء عضلة القلب، وأن تكون قادراً على إعداده في مختبرك الخاص.
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية
يصف هذا المقال إجراءً جراحياً لإحداث احتشاء عضلة القلب في الفئران، والذي يتضمن إجراء عملية فتح الصدر الأيسر وربط الشريان النازل الأمامي الأيسر. وبعد انتهاء الإجراء، يتم إغلاق الصدر، ويُترك الفأر ليتعافى تلقائياً.
يوفر نموذج الفئران هذا لاحتشاء عضلة القلب نظاماً قبل سريري قابلاً للتكرار لتقييم الفسيولوجيا المرضية القلبية والتدخلات العلاجية. وهو يتيح التحقق من الأهداف المحددة وتقليل المخاطر الآلية في عملية اكتشاف أدوية القلب والأوعية الدموية من خلال محاكاة إصابة نقص التروية وإعادة التروية البشرية. كما يدعم هذا النموذج تحديد المركبات الرائدة وتعزيز الثقة التنبؤية في مراحل البحث والتطوير المبكرة.
يندمج هذا النموذج في سير عمل الاكتشافات القلبية الوعائية، بدءاً من التحقق من الهدف وصولاً إلى اختبار الفعالية قبل السريرية.