تقنية لربط تعديل الشريان التاجي في الفئران
مارس 29, 2013
العملية الجراحية المستخدمة للحث على احتشاء عضلة القلب التجريبية في الفئران يبدأ بضع الصدر الأيسر بين الثالث والرابع في الأضلاع أجل رؤية سطح الأمامي للقلب والرئة اليسرى. وligated التاجي الأيسر الشريان، يتم إغلاق الصدر ويسمح الماوس لاسترداد تلقائيا.
الهدف العام من هذا الإجراء هو إحداث احتشاء عضلة القلب في الفئران. يتم تحقيق ذلك عن طريق عمل شق جلدي أولا على طول خط الإبط الأوسط. بعد ذلك ، يتعرض القلب عن طريق بضع الصدر الأيسر بين الضلعين الثالث والرابع.
ثم يتم إجراء ربط في الجزء القريب من الشريان الهابط الأمامي الأيسر. أخيرا ، يتم إغلاق الصدر ووضع الفأر مرة أخرى في قفص للتعافي التلقائي. في النهاية ، يمكن فحص احتشاء عضلة القلب من خلال تخطيط كهربية القلب أو تخطيط صدى القلب.
يعدالعرض البصري لهذه الطريقة أمرا بالغ الأهمية حيث يصعب تعلم ربط الشريان التاجي بالقرب من اليسار. يتم ضمان عدوى عضلة القلب الكافية عن طريق وضع الربط أسفل أوراكل اليسار مباشرة. حسنا.لكن من المهم عدم ثقب الأصول المدارة اليسرى لأنها قد تسبب نزيفا مميتا.
لبدء الجراحة ، قم بتخدير الفأر الذي يبلغ من العمر ستة أسابيع أو أكثر عن طريق الاستنشاق بنسبة اثنين إلى 5٪ من الفلور. قم بإجراء قرصة إصبع القدم للتأكد من أن مخدر بدرجة كافية. بمجرد تخدير الفأر تماما ، انقله إلى منطقة الجراحة وضعه عليه.
ظهره على وسادة دافئة. للحفاظ على درجة حرارة ثابتة تبلغ 37 درجة مئوية ، قم بتأمين الماوس بجهاز تنبيب مع غرفة مجال الفلور باستخدام 0.2 سم في أنبوب قطره وخليط من 2٪ من الفلور في الهواء. أدخل الأنبوب في القصبة الهوائية للماوس.
احلق الصدر الموجود على الجانب الأيسر ، ثم قم بتطهير المنطقة بالبيتادين. ثم 75٪ الإيثانول ثلاث مرات لكل منهما. ضع أيضا مرهم العين على عيون الفأر باستخدام مقص معقم.
قم بعمل شق 1.5 سم على طول الخط الإبطي الأوسط. يسهل هذا النهج تقييم تخطيط صدى القلب اللاحق. يتم استخدام المقص بدلا من المشرط لتجنب إصابة الأنسجة الأساسية في هذه الفئران الصغيرة.
ثم باستخدام ملقط الأوعية الحادة ، قم بفصل وسحب العضلة الكريمية من جدار الصدر. قم بإجراء بضع الصدر الأيسر بين الضلعين الثالث والرابع لتصور السطح الأمامي للقلب والرئة اليسرى. مزيد. اسحب جدار الصدر باستخدام ضام الجفن المناسب.
من أجل تحسين التصور وإمكانية الوصول باستخدام ملقط الأسنان ومقص الطرف غير الحاد ، قم بإزالة التامور. بعد ذلك ، قم بإعداد خياطة وإبرة سبعة صفر لون لربط الشريان. اربط الشريان التاجي الأيسر عن طريق وضع الإبرة أسفل الشريان بشريط من عضلة القلب بين الرباط والشرايان.
أغلق الصدر بوضع غرزتين على الضلوع الثالثة والرابعة. قلل تركيز الفلور إلى 0.5٪ واستخدم خمسة خياطة إيثيلين صفرية لإغلاق الجلد في ثلاث غرز. بالنسبة لتسكين الألم بعد الجراحة، يتم إعطاء حقنة داخل الصفاق بمقدار 0.05 ملليغرام لكل كيلوغرام من البوبرينورفين.
أخيرا ، ضع الفأر في قفص دافئ للتعافي التلقائي ووفر 0.6 ملليغرام لكل مليلتر من البوبرينورفين في مياه الشرب. راقب الفأر عن كثب خلال ال 24 ساعة الأولى بعد الجراحة للتحقق من آثار احتشاء عضلة القلب. أفضل طريقة جراحية هي تقييم وظائف القلب باستخدام تخطيط صدى القلب بعد عدة أيام من الجراحة.
باستخدام هذا البروتوكول ، يؤدي ربط الشريان التاجي الأيسر إلى إقفار عضلة القلب الذي يشرك حوالي 40٪ من البطين الأيسر. يؤدي هذا إلى تغييرات كبيرة في تخطيط القلب في الجزء ST كما هو موضح في مخطط كهربية القلب التمثيلي الذي تم قياسه قبل وبعد الربط. قبل احتشاء عضلة القلب.
مجمعات QRS المسجلة في مخطط كهربية القلب ضيقة وقصيرة. بعد احتشاء عضلة القلب ، هناك ارتفاع واضح لمقطع ST مدفون في مجمعات QRS لجعل QRS أوسع وأطول بكثير من تلك المسجلة قبل احتشاء عضلة القلب. للتحقيق في آثار احتشاء عضلة القلب ، قم بتقييم وظيفة القلب باستخدام تخطيط صدى القلب بعد عدة أيام من عملية MI.
يظهر هنا تسجيل تخطيط صدى القلب مأخوذ من الفئران التي يتم تشغيلها بشكل زائف. على النقيض من الانقباضات القلبية الجيدة التي شوهدت في الفئران التي تعمل بشكل زائف. في الفئران MI.
بعد 72 ساعة من MI ، هناك اختلال الوركة الملحوظ في جدار البطين الحر الأيسر في المرحلة الانقباضية. بعد مشاهدة هذا الفيلم ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لنموذج الماوس هذا لاحتشاء عضلة القلب ، ويجب أن تكون قادرا على إعداده في مختبرك الخاص.
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية
المحة عامة
تصف هذه المقالة إجراءً جراحيًا لتحريض احتشاء عضلة القلب في الفئران، والذي يتضمن فتح الصدر من الجانب الأيسر وربط الشريان الهابط الأمامي الأيسر. بعد العملية، يتم إغلاق الصدر، ويُترك للفأر التعافي بشكل طبيعي.
مكونات الدراسة الرئيسية
مجال العلم
- البحث في القلب والأوعية الدموية
- الجراحة التجريبية
- نماذج حيوانية
الخلفية
- احتشاء عضلة القلب هو حالة خطيرة يمكن دراستها في نماذج حيوانية.
- يسمح تحريك احتشاء عضلة القلب في الفئران بفحص وظيفة القلب.
- يتم استخدام تقنيات مثل تخطيط القلب وتخطيط صدى القلب لتقييم الأداء.
- يساعد هذا النموذج في فهم آليات أمراض القلب والعلاجات المحتملة.
غرض الدراسة
- لإنشاء نموذج موثوق من احتشاء عضلة القلب في الفئران.
- تسهيل دراسة وظيفة القلب بعد احتشاء عضلة القلب.
- لتقييم تأثيرات التدخلات المختلفة على التعافي القلبي.
الطرق المستخدمة
- شق الجلد على طول خط الإبط الأوسط.
- فتح الصدر من الجانب الأيسر بين الضلع الثالث والرابع.
- ربط الشريان الهابط الأمامي الأيسر.
- الشفاء بعد العملية في بيئة خاضعة للرقابة.
النتائج الرئيسية
- تحريض ناجح لاحتشاء عضلة القلب في نموذج الفأر.
- قدرة على مراقبة وظيفة القلب من خلال تقنيات غير غازية.
- تأسيس تقنية جراحية قابلة للتكرار.
- رؤى حول التغييرات الفسيولوجية التالية لاحتشاء عضلة القلب.
الاستنتاجات
- الإجراء يحرض بشكل فعال احتشاء عضلة القلب في الفئران.
- هذا النموذج قيم لدراسة أمراض القلب والشفاء منها.
- يمكن أن تبني الدراسات المستقبلية على هذه المنهجية لاستكشاف الخيارات العلاجية.
الأسئلة الشائعة
Executive Industry Relevance
This mouse model of myocardial infarction provides a reproducible preclinical system for evaluating cardiac pathophysiology and therapeutic interventions. It enables target validation and mechanistic de-risking in cardiovascular drug discovery by simulating human ischemia-reperfusion injury. The model supports lead identification and predictive confidence in early-stage R&D pipelines.
Strategic Applications in Biopharma R&D
Early Discovery & Target Validation
- Scientific Value: Enables interrogation of therapeutic hypotheses in ischemic heart disease models.
- Operational Value: Provides a standardized system for functional target validation and pathway clarification.
- Strategic Value: Supports predictive confidence and portfolio triage through reproducible infarct induction.
Screening & Assay Development
- Scientific Value: Prepares validated biological systems for downstream compound screening and biomarker assessment.
- Operational Value: Ensures assay standardization and quantitative outputs via ECG and echocardiography.
- Strategic Value: Enhances screening readiness and platform reuse for cardioprotective agent evaluation.
Translational & Preclinical Research
- Scientific Value: Models disease-relevant ischemia to align with translational biomarker discovery.
- Operational Value: Facilitates continuity from discovery through preclinical validation of cardiac function.
- Strategic Value: Informs risk-adjusted advancement decisions based on functional recovery metrics.
Pipeline & Workflow Integration
The model integrates into cardiovascular discovery workflows from target validation to preclinical efficacy testing.
- Discovery Biology: Supports hypothesis testing and biological de-risking in ischemic injury mechanisms.
- Screening: Enables assay readiness through reproducible LCA ligation and infarct sizing.
- Analytics: Provides quantitative ECG and echocardiography readouts for comparative condition analysis.
- Translational Research: Connects to preclinical continuity via functional recovery assessment post-MI.
- Enterprise Reuse: Serves as a reusable platform for cardioprotective and regenerative therapy evaluation.
Operational & Enterprise Impact
- Scientific Value: Predictive confidence in target validation and reduction of mechanistic ambiguity in heart failure pathways.
- Operational Value: Standardization, reproducibility, and scalability of surgical infarct induction.
- Strategic Value: Better go/no-go decisions, capital efficiency, and reduced late-stage biological risk in cardiovascular programs.
- Portfolio Impact: Risk-adjusted prioritization and advancement decisions based on infarct size and functional outcomes.
Implementation Considerations
- Required expertise in rodent surgery, anesthesia, and postoperative care.
- Instrumentation needs include ventilator, intubation tools, sutures, and imaging systems.
- Cross-team standardization requires protocol adherence for consistent infarct induction.
- Adaptation considerations across model systems include age, strain, and comorbidity variables.
- Practical limitations include surgical variability and mortality risk, necessitating operator training.
