JoVE Encyclopedia of Experiments
علم المناعة
0 مشاهدات • 2:26 د • July 8th, 2025
خذ فأرا يعاني من نقص المناعة يمتلك فقط العدلات والخلايا الوحيدة كخلايا مناعية وظيفية.
حقن السيكلوفوسفاميد داخل الصفاق ، وهو دواء يستهدف الخلايا السلفية المناعية.
يدخل الدواء الخلايا السلفية المناعية المتكاثرة بنشاط ويربط الأحماض النووية المتقاطعة ، مما يتسبب في موت الخلايا. يؤدي موت الخلايا السلفية إلى استنفاد الخلايا المناعية.
يتم تطبيق ديسولفيرام عن طريق الفم، وهو دواء يشكل مقاربة مع سيكلوفوسفاميد، مما يقلل من الآثار الجانبية التي يسببها سيكلوفوسفاميد.
حقن تحت الجلد مزيجا من الخلايا السرطانية البشرية وخلايا الدم المحيطية أحادية النواة ، أو PBMCs ، في خليط بروتين هلامي مناسب.
يشكل خليط البروتين مادة هلامية ، تحاكي المصفوفة الفسيولوجية خارج الخلية ، وتحبس الخلايا السرطانية.
يسمحاستنفاد الخلايا المناعية الوظيفية للخلايا السرطانية بالتكاثر وتكوين أوعية دموية جديدة ، وتتحول إلى طعم خشبي للورم الصلب.
في الوقت نفسه ، تتسلل الخلايا التائية من PBMCs المحقونة إلى الورم.
يظهر الطعم الغريب للورم نموا وخلايا تائية تتسلل إلى الورم ، مما يؤسس نموذجا للفأر المتوافق مع البشر.
بالنسبة لاستنفاد الخلايا النخاعية ، قم بتوصيل 100 ملليغرام لكل كيلوغرام من سيكلوفوسفاميد داخل الصفاق ، وقم بتوصيل 125 ملليغرام لكل كيلوغرام من ديسولفيرام عن طريق الفم إلى إناث NOD / SCID البالغة من العمر 6 إلى 8 أسابيع مرة واحدة يوميا لمدة يومين. بعد 24 ساعة من الجرعة الثانية من سيكلوفوسفاميد وديسولفيرام ، أعد تعليق 5 × 106 PBMC بشري معزول حديثا و 2.5 × 106 خلايا خط الخلايا السرطانية البشرية في 200 ميكرولتر من PBS بالإضافة إلى 50٪ ماتريجل لكل ، وحقن الحجم بالكامل تحت الجلد في الجانب الأيمن لكل تجريبي. قياس وتسجيل حجم الورم الأولي مرتين في الأسبوع لمدة 4 إلى 6 أسابيع.