موسوعة JoVE للتجارب
علم المناعة
0 مشاهدة • 5:41 دقيقة • July 8th, 2025
خذ كعدد الإرسال الذي يحتوي على بلازميدات مستهدفة مرتبطة بالبوليمر. تقوم البلازميدات بتشفير مستضد فيروسي مدمج في علامة الببتيد وعلامة التقارب.
احتضان الممرات بخلايا الثدييات ، والتي تستوعب البوليبلكس داخل الجسيمات الداخلية.
يحفز البوليمر تمزق الحويصلة. تعبر البلازميدات المنبعثة عن المستضد الفيروسي الذي يفرز خارج الخلية.
حصاد المادة الطافية التي تحتوي على المستضد والملوثات. أضف عاملا منافسا بتركيز منخفض.
قم بتحميله على عمود كروماتوغرافيا التقارب.
ترتبط علامات التقارب براتنج العمود ، مما يؤدي إلى شل حركة المستضد ، بينما يقلل العامل المنافس من الارتباط غير المحدد.
قم بتدفق العامل المنافس بتركيز منخفض ، وإزالة الملوثات ذات الارتباط الضعيف.
اغسل بتركيزات متزايدة من العوامل المتنافسة لإزاحة المستضدات المرتبطة بقوة ، وتفويضها.
أدخل حويصلات الغشاء الخارجي البكتيرية ، أو OMVs ، مع بروتين التقاط مرتبط بالسطح واحتضانه.
ترتبط علامات ببتيد المستضد ببروتينات الالتقاط ، وتشكل لقاح OMV مع عرض مستضد متعدد التكافؤ.
قم بإجراء تنقية OMV SpyCatcher. ابدأ بالطرد المركزي للمحلول البكتيري. قم بتصفية المادة الطافية باستخدام مرشح غشائي 0.22 ميكرومتر ، ثم ركزها باستخدام عمود ألياف مجوف. قم بتصفية المركز من خلال مرشح غشائي 0.22 ميكرومتر ، ثم قم بالطرد المركزي عند 150,000 مرة جم عند 4 درجات مئوية لمدة ساعتين با
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية