JoVE Encyclopedia of Experiments
علم المناعة
0 مشاهدات • 2:16 د • July 8th, 2025
ابدأ بفأر مخدر وقم بإعطاء سلالة BCG المخففة الحية من المتفطرة ، والتي قللت من القدرة على التسبب في الأمراض ، من خلال أنف الفأر.
تحفز البكتيريا المحقونة استجابة مناعية في أنسجة الرئة والعقدة الليمفاوية القريبة.
هذا يؤدي إلى توليد الخلايا التائية المستجيبة والخلايا البائية التي تدخل دوران الفأر.
تنتج الخلايا البائية المستجيبة أجساما مضادة ضد البكتيريا الفطرية.
وفي الوقت نفسه ، تستقر الخلايا التائية المستجيبة في أنسجة الرئة كخلايا تائية للذاكرة المقيمة أو خلايا TRM ، مما يوفر مناعة طويلة الأمد.
لتقييم فعالية التمنيع، يتم إعطاء البكتيريا الفطرية الحية الخبيثة ذات القدرة على التسبب في المرض من خلال أنف الفأر.
يؤدي هذا إلى تنشيط خلايا TRM في أنسجة الرئة.
تطلق خلايا TRM المنشطة السيتوكينات ، وتجذب الخلايا المناعية الأخرى ، بما في ذلك الخلايا البائية المستجيبة.
تفرز هذه الخلايا البائية أجساما مضادة ترتبط بالبكتيريا الفطرية ، مما يعزز تطهيرها بواسطة العدلات ، مما يشير إلى التحصين الناجح.
للإعطاء داخل الأنف، قم بتحميل ماصة دقيقة بسعة 20 ميكرولترا من تعليق BCG، وضع الفأر المخدر في وضع ضعيف داخل الغطاء. قم بإدارة اللقاح بالتنقيط بين فتحتي الأنف حتى يتم ترسيب الحجم الكامل البالغ 20 ميكرولتر ، مع ترك الوقت بين القطرات للسماح للفأر باستنشاق التعليق. بعد ذلك ، أعد تحميل الماصة الدقيقة ب 20 ميكرولترا أخرى من البكتيريا وكرر الإدارة.
بالنسبة للتحدي داخل الأنف مع سلالة المتفطرة السلية H37Rv ، في النقطة الزمنية التجريبية المناسبة بعد التطعيم ، قم بتطعيم بإعطاء 40 ميكرولترا من المعلق البكتيري H37Rv داخل الأنف كما هو موضح للتو.