توصيل الجينات المرتبطة بالمناعة بوساطة الجراحة إلى أنسجة جلد الفأر

تحضير فأر مخدر معدل وراثيا يفتقر إلى تعبير السيتوكين إنترلوكين -15.

حلق جلد الجناح الظهري ووضع كريم لإزالة الشعر للتخلص من أي خصلات شعر متبقية ، مما يسهل تسريب الحمض النووي المحسن في الجلد في الخطوات اللاحقة.

تعقيم سطح الجلد الظهري وتحديد المنطقة المستهدفة لنقل الحمض النووي.

ضع قطرة صغيرة من الحمض النووي البلازميد الذي يشفر إنترلوكين -15 على السطح المحدد.

باستخدام حزمة إبرة الوخز بالإبر ، قم بوخز سطح الجلد الملحوظ بشكل متكرر.

تتأرجح حركة وخز حزمة الإبرة بلطف سطح الجلد ، مما يؤدي إلى إرخاء الخلايا الميتة لطبقة الجلد الخارجية.

علاوة على ذلك ، فإن الإبر المتذبذبة تكشط أغشية البلازما للخلايا ، مما يعزز الحدة ، أو توصيل الحمض النووي بوساطة الوخز بالإبر إلى الخلايا ، بما في ذلك الخلايا الكيراتينية والخلايا المتغصنة.

الآن ، اسمح للماوس بالتعافي.

تنتج الخلايا التي تم نقلها بنجاح في الجلد بروتينات الإنترلوكين -15.

بعد تخدير الفأر ، ضع مرهما بيطري لطب العيون على عينيه لمنع الجفاف. بعد ذلك ، احلق الجلد على ظهر وضعي كريما لإزالة الشعر لإذابة بروتينات الكيراتين في خصلات الشعر المتبقية. بعد إزالة الشعر ، امسحي الكريم بالقطن المنقوع بالماء.

باستخدام قطعة قطن معقمة مبللة بنسبة 70٪ من الإيثانول ، قم بتطهير سطح الجلد وتمييز منطقة الجلد المستهدفة بقالب معد مسبقا. ضع 10 ميكرولترات من محلول الحمض النوو