اختبار في المختبر لتقييم النشاط المضاد للورم للخلايا التائية ذات المستضدات المستضدة للورم

خذ صفيحة متعددة الآبار تحتوي على خلايا ورم الغدد الليمفاوية للخلايا البائية تعبر عن مستضد سطحي خاص بالخلايا البائية وإنزيم لوسيفيراز السيتوبلازمي.

أدخل خلايا CAR T في آبار مختارة واحتضنها. تعبر الخلايا عن مستقبلات مستضد خيمرية ، أو CARs ، تشتمل على مجال خارج الخلية يستهدف مستضد الورم ومجالات الإشارات داخل الخلايا.

يرتبط CAR بمستضد الورم ، مما يؤدي إلى تنشيط الخلايا التائية CAR.

تطلق الخلايا المنشطة السيتوكينات التي تعزز نشاط الخلايا المضاد للورم ، مما يؤدي إلى إطلاق السموم.

تدخل

السموم إلى الخلايا السرطانية وتحفز موت الخلايا.

قم بتدوير الخلايا وعزل المادة الطافية. تحديد كمية السيتوكينات لتقييم نشاط الخلايا التائية CAR.

أعد تعليق الخلايا في مخزن مؤقت يحتوي على لوسيفيرين ، وهو ركيزة مضيئة بيولوجيا.

عند الدخول ، يتأكسد اللوسيفيرين بواسطة لوسيفيراز في الخلايا السرطانية الحية ، مما ينبعث منه الضوء.

قم بقياس التلألؤ البيولوجي لتحديد إشارة منخفضة في الخلايا السرطانية المعالجة ، مما يؤكد السمية الخلوية بوساطة الخلايا التائية CAR Et.

أولا ، قم بزرع 10,000 خلية سرطانية مستهدفة إيجابية CD19 مع أو بدون تعبير لوسيفيراز ، و 100 ميكرولتر من الطب الصيني التقليدي في كل بئر من لوحة ثقافة الأنسجة ذات القاع 96 بئرا. أضف 10,000 خلية CD19 CAR T و 100 ميكرولتر من الطب الصيني التقليدي لكل بئر.

قم بإعداد ع