موسوعة JoVE للتجارب
علم المناعة
0 مشاهدة • 2:55 دقيقة • July 8th, 2025
خذ صفيحة متعددة الآبار تحتوي على خلايا قاتلة طبيعية وخلايا سرطانية. تحتوي آبار التحكم على خلايا سرطانية فقط.
جهاز طرد مركزي لتسهيل الاتصال الخلوي.
حضن. ترتبط المستقبلات المنشطة على الخلايا القاتلة الطبيعية بالروابط السطحية للخلايا السرطانية ، مما يؤدي إلى تحفيز الخلايا القاتلة الطبيعية على إطلاق حبيبات تحتوي على جزيئات سامة للخلايا.
تخلق هذه الجزيئات مسام غشاء الخلايا السرطانية وتحفز موت الخلايا المبرمج الذي يطلق محتويات داخل الخلايا ، بما في ذلك نازعة هيدروجين اللاكتات ، أو LDH.
أضف منظفا لتحلل الخلايا السرطانية في آبار التحكم لتحقيق أقصى قدر من إطلاق LDH.
جهاز طرد مركزي ونقل جزء من المواد الطافية المحتوية على LDH إلى لوحة فحص.
أضف كاشف الفحص واحتضانه.
يحول LDH اللاكتات إلى بيروفات مما يقلل NAD +. يستخدم Diaphorase NADH لتقليل ملح التيترازوليوم ، وتشكيل منتج فورمازان أحمر اللون.
أضف محلولا حمضيا لإيقاف التفاعل الأنزيمي.
استخدم قارئ الألواح الدقيقة لقياس امتصاص الفورمازان في الآبار.
تتناسب شدة الفورمازان مع عدد الخلايا السرطانية المحللة في بئر الاختبار ، مما يشير إلى السمية الخلوية للخلايا القاتلة الطبيعية ضد الخلايا السرطانية.
أولا ، احصل على لوحة 96 بئرا معالجة بالثقافة مستديرة القاع ، وقم بإعدادها كما هو موضح في الجدول 1 من بروتوكول النص. قم بالطرد المركزي للوحة الفحص عند 250 مر
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية