اختبار لتقييم التأثيرات المضادة للسرطان للطافي الخالي من الخلايا اللبنية

خذ صفيحة متعددة الآبار تحتوي على كرويات سرطان القولون والمستقيم في وسط النمو.

الكرويات عبارة عن مجاميع ثلاثية الأبعاد للخلايا السرطانية تشبه البيئة المكروية الفسيولوجية للورم.

قم بإزالة وسط النمو وأضف تركيزات متزايدة من المادة الطافية الخالية من الخلايا الملبنة ، أو LCFS ، وهو مادة طافية مزرعة تم الحصول عليها من ثقافة Lactobacillus ، وهي بكتيريا في الجهاز الهضمي.

يخلو LCFS من الخلايا البكتيرية ولكنه يحتوي على مستقلبات نشطة ذات نشاط مضاد للسرطان تفرزه البكتيريا.

تتفاعل المستقلبات البكتيرية في LCFS مع الخلايا السرطانية في الكروية ، مما يؤدي إلى موت الخلايا المبرمج ويؤدي إلى موت الخلايا.

يؤدي تلف الخلايا إلى تعطيل مورفولوجيا الشكل

.

باستخدام المجهر ، افحص الكرات الكروية المعالجة ب LCFS لملاحظة زيادة في موت الخلايا مع زيادة تركيز LCFS ، مما يشير إلى النشاط المضاد للسرطان المعتمد على الجرعة للمستقلبات البكتيرية.

لعلاج LCFS ، قم بتخفيف محلول مخزون LCFS المذاب المحضر بشكل متسلسل في وسط نمو جديد إلى تركيزات 25٪ و 12.5 و 6٪ واستخدم ماصة سعة 200 ميكرولتر لإزالة أكبر قدر ممكن من المواد الطافية بعناية من كل بئر من مزارع خط خلايا سرطان القولون والمستقيم المطلية.

ثم أضف برفق 200 ميكرولتر من وسط النمو المكمل ب LCFS في ثلاث نسخ لكل مجموعة من الخلايا السرطانية ، وأعد اللوحة إلى الحاضنة لمدة 24 إلى 48 ساعة إضافية.