علاج العاثيات ضد عدوى الزائفة الزنجارية في أجنة أسماك الزرد

خذ أجنة سمك الزرد التليف الكيسي المخدر المنشط المعرضة للعدوى الزائفة الزنجارية.

حقن Pseudomonas aeruginosa التي تعبر عن البروتين الفلوري في وعاء دموي رئيسي ، قناة Cuvier.

انقل الأجنة المحقونة إلى صفيحة بها وسائط وعامل مانع للتصبغ لتثبيط تصبغ الجنين وتصور البكتيريا. حضن.

تتحرك البكتيريا المحقونة عبر الدورة الدموية وتغزو الأعضاء.

استجابة لذلك ، يتم تنشيط الجهاز المناعي المضيف ، وإطلاق وسطاء مؤيدين للالتهابات وتجنيد الخلايا المناعية.

بعد الحضانة ، قم بحقن مزيج من العاثيات الخبيثة ضد Pseudomonas aeruginosa في قناة Cuvier وانقل الأجنة إلى صفيحة تحتوي على وسائط وعامل مانع للتصبغ.

حضن. تصيب العاثيات البكتيريا وتستخدم الآلات المضيفة لإنتاج جزيئات العاثيات الجديدة.

تتحلل البكتيريا ، وتطلق العاثيات التي تصيب البكتيريا المجاورة ، مما يؤدي إلى انخفاض الاستجابة المؤيدة للالتهابات.

باستخدام المجهر الفلوري ، لاحظ التألق البكتيري المنخفض في أجنة الزرد بمرور الوقت ، مما يشير إلى فعالية العاثيات ضد Pseudomonas aeruginosa.

بعد 26 ساعة من الإخصاب ، قم بتحميل إبرة حقن مجهرية بحوالي 5 ميكرولتر من P. aeruginosa لقاح ، وأدخل الإبرة ظهريا إلى نقطة البداية لقناة Cuvier ، حيث تبدأ القناة في الانتشار فوق كيس الصفار. حقن 1 إلى 3 نانولترات من لقاح PAO1 في الجنين ، مع التأكد من أن الحجم يتوسع مباشرة داخل القناة