تنقية الجسيمات النانوية البروتينية ذاتية التجميع باستخدام كروماتوغرافيا التقارب

خذ تعليقا من البكتيريا المهندسة التي تعبر عن جزيئات البروتين النانوية المؤتلفة ذاتية التجميع مع علامات البولي هيستيدين.

سونيكات لإطلاق المكونات داخل الخلايا.

جهاز طرد مركزي لجمع المادة الطافية التي تحتوي على جزيئات البروتين النانوية. قم بتخفيفه باستخدام مخزن مؤقت خال من الإيميدازول.

خذ عمودا كروماتوغرافيا متقاربا يحتوي على حبات الاغاروز مع كاتيونات النيكل المجمدة.

أضف حاجزا بتركيز إيميدازول منخفض لتوازن الأعمدة.

أضف المحلل البكتيري إلى العمود.

أثناء التشغيل ، يرتبط البولي هيستيدين على الجسيمات النانوية البروتينية بقوة مع كاتيونات النيكل.

وفي الوقت نفسه ، ترتبط الملوثات مثل عديدات السكاريد الدهنية البكتيرية والبروتينات الأخرى بشكل ضعيف بالعمود.

يغسل بمخزن مؤقت يحتوي على تركيز إيميدازول منخفض لإزالة البروتينات ضعيفة الارتباط.

أدخل الأيزوبروبانول لإزالة عديدات السكاريد الدهنية ثم غسلها.

بعد ذلك ، أدخل عازلة بتركيز إيميدازول متوسط. يتنافس الإيميدازول مع الهيستيدين للارتباط بكاتيون النيكل ، وإطلاق جزيئات البروتين النانوية المقلدة.

بعد ذلك ، أضف عازلة تحتوي على تركيز عال من إيميدازول لتصفية الجسيمات النانوية للبروتين تماما.

اجمع جزيئات البروتين النانوية المنقاة لمزيد من التطبيق.

لتحلل الإشريكية القولونية المحصودة التي تعبر عن حزمة اللولب الستة SAPN ، استخدم مسبارا بإخراج صوتنة يبلغ 150 و