التوصيل الفموي لخلايا الخميرة المحولة إلى الجهاز المناعي المعوي للفأر

ابدأ بأنبوب فموي يحتوي على معلق من الخميرة الموجهة وراثيا غير القادرة على إنتاج قاعدة اليوراسيل النووية.

أدخل الأنبوب الفموي في فم الفأر المقيد ووجهه إلى المعدة.

قم بإدارة معلق الخميرة مباشرة في المعدة ، مما يسمح لها بالوصول في النهاية إلى الأمعاء الدقيقة.

تحتوي الأمعاء الدقيقة على خلايا ظهارية ، مع بقع باير الغنية بالخلايا المناعية.

الخلايا الدقيقة ، الخلايا الظهارية المعوية المتخصصة بالقرب من بقع باير ، تبتلع خلايا الخميرة وتستوعبها في حويصلات.

تتحرك هذه الحويصلات عبر الخلايا وتطلق خلايا الخميرة في رقعة باير الأساسية.

اعزل رقعة باير عن أمعاء الفأر المضحية واحصل على تعليق خلوي موحد.

استزراع معلق الخلية هذا على وسط انتقائي للخميرة يحتوي على اليوراسيل.

تستخدم الخميرة Auxotrophic اليوراسيل وتتكاثر لتشكيل مستعمرات ، مما يؤكد توصيل خلايا الخميرة المحولة إلى الجهاز المناعي المعوي للفأر.

بعد تحضير مزارع الخميرة وفقا لبروتوكول النص ، استخدم مقياس كثافة الدم لتحديد تركيز الخلية ، واضبط على 10 إلى الخلايا التاسعة لكل مليلتر. بيليه الخلايا عن طريق الطرد المركزي في 2,500 مرة جم لمدة ثلاث دقائق. بعد ذلك ، اسكب المادة الطافية ، وأعد تعليق الخلايا عن طريق إضافة الحجم المناسب من الماء المعقم ، وسحب العينة برفق لأعلى ولأسفل.

قم بتثبيت إبرة تزقيم قياس مناسبة على حقنة معقمة سعة 1 مليلتر ، وقم بتحميل