طريقة لمعالجة الخلايا المتغصنة بالملح العالي ونقلها بالتبني إلى الفئران

ابدأ بلوحة متعددة الآبار تحتوي على معلق من الخلايا المتغصنة أو DCs.

لتقليد حالة ارتفاع ضغط الدم ، أضف وسط استزراع يحتوي على تركيز عال من أيونات الصوديوم واحتضانه.

أثناء الحضانة ، تدخل أيونات الصوديوم إلى الخلية ، مما يزيد من تركيز الصوديوم داخل الخلايا.

يؤدي هذا إلى تبادل أيونات الصوديوم داخل الخلايا مع أيونات الكالسيوم خارج الخلية.

تعمل

زيادة مستويات الكالسيوم الداخلية على تنشيط المسارات التي تسهل توليد الألدهيدات التفاعلية ، والتي ترتبط بالبروتينات الخلوية. يؤدي هذا إلى تنشيط DCs ، التي تعرض هذه البروتينات المعدلة على سطحها.

بعد الحضانة ، اجمع الخلايا في أنبوب وجهاز طرد مركزي.

قم بإزالة المادة الطافية. أضف مخزن مؤقت جديدا لإعادة تعليق الخلايا.

ارسم معلق الخلية في حقنة.

خذ فأرا مخدرا وحقن معلق الخلية بشكل رجعي وهي منطقة خلف محجر العين.

تسمى عملية حقن الخلايا المناعية المنشطة هذه بنقل الخلايا بالتبني.

ماصة 900 ميكرولتر من نظام التعليق DC في صفيحة صقر مسطحة القاع المسطحة ذات 24 بئرا. أضف 100 ميكرولتر من وسائط ثقافة التيار المستمر عالية الملح إلى كل بئر للحصول على تركيز نهائي من الصوديوم يبلغ 190 ملليمول. قم بتسمية الطبق وضعه في حاضنة ثاني أكسيد الكربون المرطبة عند 37 درجة مئوية لمدة 48 ساعة.

بعد 48 ساعة ، أخرج اللوحة من الحاضنة. امسح وسائط زراعة الخلية في بئر واحد لأعلى ولأسفل لإعاد