طريقة في المختبر لتوليد سقالات الخلايا النجمية داخل أعمدة الهيدروجيل الدقيقة

خذ طبقا ثقافيا يحتوي على قارب ذو عمود صغير يتكون من أنابيب مجوفة ذات قطر محدد.

تمتلئ الأعمدة الدقيقة ، المصنوعة من هيدروجيل ، بمخزن مؤقت لمنع الجفاف.

تحت المجهر المجسم ، قم بإزالة المخزن المؤقت وأضف محلول الكولاجين المثلج ، وهو أحد مكونات المصفوفة خارج الخلية.

أدخل وسيطا على طول الحافة الداخلية للطبق للحفاظ على ترطيب العمود. احتضن في ظل ظروف فسيولوجية حتى يتبلمر الكولاجين ، ويشكل طبقة داخل الأعمدة الدقيقة.

أضف الخلايا النجمية داخل الأعمدة الدقيقة واحتضانها لتعزيز التصاق الخلايا النجمية بالكولاجين.

بعد ذلك ، املأ الطبق بالوسط وحافظ عليه في ظل الظروف الفسيولوجية.

نظرا للقطر الضيق للأعمدة الدقيقة ، تكتسب الخلايا النجمية مورفولوجيا ثنائية القطب مع عمليات تمتد على طول الطول.

بمرور الوقت ، تتجمع الخلايا النجمية ذاتيا لتشكيل سقالة ثلاثية الأبعاد تحتوي على حزم كثيفة من عمليات الخلايا النجمية.

سقالة الخلايا النجمية المغطاة بالهيدروجيل جاهزة للمقايسات النهائية.

داخل خزانة السلامة الحيوية ، قم بإعداد محلول 1 ملليغرام لكل مليلتر من الكولاجين من النوع الأول من ذيل الفئران في وسط الزراعة المشتركة ثم ضعه على الثلج. اضبط الرقم الهيدروجيني لمحلول ECM بالحمض أو القاعدة حسب الضرورة ، حتى يستقر الرقم الهيدروجيني في النطاق 7.2 إلى 7.4. انقل قارب العمود الدقيق إلى طبق بتري سعة 35 أو 60 مل مع ملقط. باستخ