تمايز الخلايا الجذعية البشرية متعددة القدرات في الخلايا العصبية باستخدام فيروسات العدسات المهندسة

عالج الخلايا الجذعية البشرية متعددة القدرات الملتصقة بفيروسات العدسات المهندسة في كاشف التعداد.

يحمل الفيروس جينات لمقاومة المضادات الحيوية وعامل النسخ العصبي ، الذي تتحكم فيه العناصر التنظيمية المستجيبة للتتراسيكلين.

يعزز

كاشف التعداء موجب الشحنة الاندماج الفيروسي وإطلاق محتواه.

ينسخ الحمض النووي الريبي الفيروسي إلى الحمض النووي ويتكامل في الحمض النووي للخلايا الجذعية ، مما يتيح التعبير عن العناصر التنظيمية التي تنتج بروتينات المنشطة.

أضف وسطا قاعديا بمشتق التتراسيكلين ، والذي يشكل مركبا مع بروتينات المنشط.

يرتبط هذا المركب بالعنصر المستجيب للتتراسيكلين ، مما يعزز التعبير الجيني وينتج عوامل النسخ العصبية التي تحفز تمايز الخلايا الجذعية إلى خلايا عصبية.

أضف وسطا قاعديا مع دواء مضاد حيوي للقضاء على الخلايا غير المنقولة.

عالج الخلايا بمحلول انفصال يحتوي على إنزيمات محللة للبروتين تحلل المصفوفة خارج الخلية أو ECM وتطلق الخلايا.

قم بإزالة الإنزيمات وأعد صفيحة الخلايا على آبار مغلفة ب ECM مع وسط نضج ، مما يعزز نضوج الخلايا العصبية.

قبل يومين من تحريض التمايز ، افصل الخلايا الجذعية الجنينية عن طريق إضافة 1 مليلتر من محلول انفصال الخلية ، واحتضانها في درجة حرارة الغرفة لمدة 10 دقائق. نقل الخلايا إلى أنبوب. ثم اغسل البئر ب 2 مل من الوسائط وأضفه إلى نفس الأنبوب. الطرد المركزي للخلايا في 300