تلطيخ مناعي الأنسجة لتصوير قياس الكتلة الخلوية

ضع شريحة زجاجية مع عينة من الأنسجة الثابتة في مخزن مؤقت لاسترجاع المستضد وقم بتسخينها.

تكسر درجة الحرارة المرتفعة ودرجة الحموضة القلوية للمخزن المؤقت الروابط المتشابكة للبروتين الناجم عن التثبيت ، مما يؤدي إلى تعريض حواتم المستضد.

قم بتبريد الشريحة لمنع تلف الأنسجة الناجم عن الحرارة ، ثم اشطفها لإزالة المخزن المؤقت الزائد.

ضع حاجزا مسعورا وضع الشريحة في غرفة الرطوبة.

إضافة مخزن مؤقت لحظر النفاذية. يتخلل منظف المخزن المؤقت الأغشية الخلوية ، وتخفي البروتينات الحجب مواقع الربط غير المحددة لتقليل تلطيخ الخلفية.

قم بإزالة المخزن المؤقت الزائد ، وأضف كوكتيل الأجسام المضادة المترافقة بالمعدن ، واحتضنه للسماح بارتباط الأجسام المضادة بمستضدات معينة.

اغسل الشريحة وإزالة الأجسام المضادة غير المرتبطة.

أضف بقعة نووية مترافقة بالمعدن تدخل الخلايا وترتبط بالحمض النووي.

اشطف البقعة الزائدة وجفف الشريحة.

باستخدام ماسح ضوئي ، احصل على صور عالية الدقة للسمات الهيكلية للأنسجة ، مما يساعد في تفسير البيانات من تحليل قياس الكتلة الخلوية للعينة الملطخة.

ابدأ بقسم من الأنسجة المعالجة مسبقا بحجم خمسة ميكرومتر مثبت فوق شريحة متوافقة مع التلوين المناعي. ضع الشرائح في مرسل شرائح.

لاسترجاع الحاتمة الناجمة عن الحرارة أو HIER ، أضف المخزن المؤقت HIER في مرسل التمرير المنزلق حتى يتم غمر الأنسجة تماما. ضع البريد ال